[发明专利]一种试剂及其在检测二价铜离子中的应用

权利要求书

1.一种试剂：特征在于它是2-pyridylaldehyde fluorescein hydrazone(PFH)，其结构式为：

2.如权利要求1所述的一种试剂的合成方法，其特征在于步骤为：将荧光素酰肼和2-吡啶甲醛按摩尔比1∶1完全溶解在甲醇溶液中，滴加1摩尔当量的无水乙酸，回流2小时，用体积比为1∶1的甲醇和石油醚重结晶得到PFH。

3.一种检测二价铜离子的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)、配制pH＝7.0、浓度为1-100mM的HEPES缓冲溶液，并用乙醇配制2mM的PFH乙醇溶液；

(2)、按体积比500∶9将HEPES缓冲溶液和PFH乙醇溶液加到干净的紫外比色皿中，在紫外可见分光光度仪上检测，随着待测样的加入，500nm出现新的吸收峰并逐渐升高，当吸收峰不再升高时，停止加待测样，此时加入待测样的体积计为V_待测样；

(3)、按V_PFH×3×2×10^-3/V_待测样样计算出待测样中二价铜离子的浓度(mol/L)。

4.一种检测二价铜离子的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配制pH＝7.0、浓度为1-100mM的HEPES缓冲溶液，并用乙醇配制2mM的PFH乙醇溶液；

(2)按体积比2000∶3将HEPES缓冲溶液和PFH乙醇溶液加到干净的紫外比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样的加入，518nm出现明显的荧光增强，且随着二价铜离子浓度的增大，荧光强度也增大，当强度不再增大时，停止加待测样，此时加入待测样的体积计为V_待测样；

(3)按V_PFH×3×2×10^-3/V_待测样计算出待测样中二价铜离子的浓度(mol/L)。

5.如权利要求1所述的试剂在细胞成像中的应用。