[发明专利]金环蛇抗菌肽cathelicidin－BF的应用

说明书

技术领域：

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF在制备治疗细菌性阴道炎药物中的应用。 

背景技术：

Cathelicidin是一个具有多功能的抗菌肽家族，目前仅在哺乳类、鸟类和鱼类中有发现。Cathelicidin具有广谱的抗菌活性，不仅对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、某些真菌以及病毒具有非常强的杀菌活性，而且对许多临床耐药细菌同样具有作用。除此之外，cathelicidin还具有许多其他生物学活性，如对多种免疫细胞具有趋化作用、诱导肥大细胞脱粒和组织胺释放、调节巨噬细胞转录、促进伤口愈合、诱导血管发生、诱导变异细胞系细胞凋亡和淋巴细胞活化等。由于具有如此众多的活性，cathelicidin一直是国际上研究的热点。针对cathelicidin的药用开发则蕴含着巨大的临床治疗药物制备价值。 

随着青霉素等传统抗生素的大规模和不恰当使用，微生物对传统抗生素产生了越来越强的耐受性，在临床上已经出现了大量能够完全耐受青霉素等传统抗生素的微生物，已有的抗生素对这些病原微生物无能为力。抗菌肽是一种新型的抗微生物多肽，大多数抗菌肽分子量小于10000Da，带正电，富含疏水碱基，能够形成两亲性的结构。抗菌肽的杀菌机制主要是通过静电相互作用吸引并结合到带负电的细菌细胞膜表面，进一步在细菌细胞膜上形成跨膜的孔洞，导致细菌细胞内容物的外泄，从而导致细菌细胞的死亡。而传统抗生素主要是作用于细菌细胞内的一些酶类。正是由于作用方式的不同，抗菌肽介导的杀菌作用远远快于传统抗生素，并且不易使细菌产生耐受性。除此之外，越来越多的文献报道表明抗菌肽还具有其他的杀菌机制，如抑制细菌细胞壁合成、改变细菌细胞质膜抑制隔膜形成、激活自溶素、抑制细胞内酶活性、抑制DNA、RNA和蛋白质的合成等。 

目前，国外有许多公司正在进行抗菌肽的研究开发，已有多种抗菌肽进入临床试验阶段。如来源于人lactoferrin的hLF-1-1用于治疗骨髓干细胞移植相关的感染，已进入临床II期。来源于非洲爪蟾magainin的MSI-78对糖尿病患者的足部溃疡有显著疗效且副作用小，已进入临床III期试验阶段。来源于猪protegrin的IB-367用于治疗肿瘤患者口腔溃疡，已进入临床I期试验。除此之外，一些用于伤口愈合，内毒素感染， 肿瘤，病毒感染的抗菌肽也已进入临床试验阶段。 

在中国的传统中药和民族医药中，许多蛇类被作为药材而得到广泛的应用，如乌稍蛇，蟒蛇，蝮蛇，金环蛇，银环蛇，眼镜蛇，五步蛇等。蛇全身均可入药，蛇肉具有强壮神经、延年益寿功效，可治疗病后体弱、风痹麻木、关节疼痛等症。蛇胆具有祛风、清热、化痰、明目的功效，主治小儿疳积、痔疮肿痛。蛇胆汁乙醇溶液能有效治疗角膜炎、角膜溃疡、角膜斑翳。以蛇胆汁、川贝母、杏仁为主要原料制成的“蛇胆川贝液”，是目前临床使用方便、疗效显著的止咳祛痰良药，蛇蜕具有祛风定惊、杀虫、退翳消肿、清热解毒的功能，可治目翳、疮疖、痔漏、痄腮、疟疾、小儿惊痫、疥癣、瘰疬等症。蛇毒是目前国际药材市场上十分昂贵的珍奇药材，利用蝮蛇毒制成的注射液，具有明显的抗癌、抗血凝作用。 

与此同时，传统中药药物成分的复杂性及其炮制方法的局限性造成药物活性成分不能更好的发挥作用，因而从这些传统药物中寻找特定的活性单体化合物是中药现代化的重要内容之一。迄今为止，国内外学者已经从蛇毒中分离出大量生物活性蛋白及多肽，其中的许多活性多肽具有很好的药物开发前景。 

金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF是由发明者从金环蛇毒液发现的由30个氨基酸组成的的抗微生物肽，含有三十个氨基酸残基，分子量为3637.54Da，等电点11.79。金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF全序列为：赖氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-赖氨酸-丝氨酸-缬氨酸-赖氨酸-赖氨酸-精氨酸-丙氨酸-赖氨酸-谷氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-赖氨酸-赖氨酸-脯氨酸-精氨酸-缬氨酸-异亮氨酸-甘氨酸-缬氨酸-丝氨酸-异亮氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸，具有显著的抗菌活性，并且溶血活性和细胞毒性都很低(见文献Wang Y，Hong J，Liu X，Yang H，Liu R，Wu J，Wang A，Lin D，Lai R.Snake cathel icidin from Bungarus fasciatusis a potent peptide antibiotics.PLoS One.2008；3(9)：e3217)。 

发明人将金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF作为制备治疗细菌性阴道炎药物中的应用，未发现有任何相同应用。