[发明专利]汉源乌头中一种新型C19二萜生物碱及其在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种从毛茛科乌头属瓜叶乌头变种汉源乌头中分离得到的一种新型C₁₉二萜生物碱及其抗肿瘤应用。 

背景技术

乌头属(Aconitum)植物属于毛茛科(Ranunculaceae)，分布于北温带，全世界约350种，我国约有170种，主要分布于云南北部、四川西部和西藏东部的高山地带。瓜叶乌头(Aconitum hemsleyanum Pritz.)，又称藤乌、草乌、乌毒、盐附子等，主要分布于四川、湖南湖北北部等地，生长与海拔1700-2200山地林中或灌木中。汉源乌头(Aconitum hemsleyanum var.hanyuanum)为雅安特产瓜叶乌头的一个新变种。现代药理学研究表明其主要活性成分为C₁₉型二萜生物碱，具有广泛的生理活性，主要表现在抗炎、镇痛、抗肿瘤等方面。从中开发的无成瘾性镇痛药高乌甲素、草乌甲素和3-乙酰乌头碱已成功上市。 

目前还未见有从汉源乌头植物中提取、分离出如结构式(I)所示的C₁₉二萜生物碱及其用途方面的报道。 

发明内容

本发明提供一种结构新型的抗肿瘤药物，或作为抗癌药物的前体或先导化合物，具有很好的开发前景。 

本发明的目的在于提供一种新型结构的C₁₉型二萜生物碱及其在制备预防或治疗肿瘤药物肿瘤的药物，或作为抗癌药物的前体或先导化合物中的应用。 

本发明提供如下结构所示的C₁₉型二萜生物碱： 

本发明的目的在于提供一种包含所述二萜生物碱和药学上可接受载体的药物组合物。 

本发明主要是采用用盐酸渗滤，应用阳离子交换树脂法提取总生物碱，根据极性的不同运用溶剂法对总生物碱进行了粗分，然后主要采用溶剂法、硅胶柱层析、离心薄层层析法进行总碱分离得到结构式(I)化合物，其包括如下具体步骤： 

(1)取汉源乌头(Aconitum hemsleyanum var.hanyuanum)干燥块根，粉碎； 

(2)用0.05mol/L HCl渗滤，将渗滤液应用阳离子交换树脂法提取总生物碱，然后用10％的氨水浸泡树脂使其碱化，用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液； 

(3)将洗脱液减压，浓缩，再用10％HCl酸化至pH 1，抽滤，收集滤液，得到总生物碱提取液，运用乙醚连续回流法提取滤液，最后浓缩干燥得到结构式(I)化合物。 

结构式(I)C₁₉二萜生物碱化合物为白色无定形粉末，分子式为C₃₃H₄₅NO₁₁，其核磁数据如下表1： 

表1 

^a Recorded in CDCl₃，¹H-NMR at 400MHz，¹³C-NMR at 100MHz，δin ppm，and Jin Hz 

经过大量实验证明，本发明的化合物具有显著的抗肿瘤活性，尤其是肝癌、肺癌、胃癌、大肠癌和黑色素瘤等方面，具有很好的开发前景。 

附图为本发明所述化合物各碳氢信号2D-NMR(1H-1HCOSY，HMQC，HMBC)相关关系。 

具体实施方式：

实施例1 

取汉源乌头(Aconitum hemsleyanum var.hanyuanum)干燥块根，粉碎；用0.05mol/L HCl渗滤，将渗滤液应用阳离子交换树脂法提取总生物碱，然后用10％的氨水浸泡树脂使其碱化，用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；将洗脱液减压，浓缩，再用10％HCl酸化至pH值为1，抽滤，收集滤液，得到总生物碱提取液，运用乙醚连续回流法提取滤液，最后浓缩干燥得到结构式(1)化合物，其核磁数据见表1。 

实施例2 

抗肿瘤活性实验： 

(1)接种细胞：收集对数期HCT-8、HePG2、BGC-823、A549、A375实验细胞，调整细胞悬液浓度配成单个细胞悬液，以每孔1000-10000个细胞分别接种到96孔板，每孔体积100μL。