[发明专利]重组生物及由重组生物制作的蛋白质

说明书

技术领域

本发明涉及重组生物及由重组生物制作的蛋白质。

背景技术

作为具有优异强度的天然纤维，蜘蛛丝备受关注。但是，蜘蛛由于会互相残食因而不适于集体饲养，由1只蜘蛛获得的丝的量是很微量的。而且，由于蜘蛛会根据目的分别使用多种类的丝，因而蜘蛛丝的大量生产是很困难的。

因此，尝试了使用基因重组技术将编码蜘蛛丝蛋白的基因导入到蜘蛛以外的生物中来制作蜘蛛丝。例如公开了在基因重组山羊中制作蜘蛛丝蛋白、从山羊奶中获得蜘蛛丝蛋白的方法(专利文献1：日本特表2002-506642号公报)。但是，利用上述方法时，需要对蜘蛛丝蛋白进行抽提、精制、人工纺丝，在人手时间、成本、溶剂对环境的负荷等方面存在问题。

为了解决上述问题，尝试了在桑蚕中导入编码蜘蛛丝蛋白的基因来制作蜘蛛丝蛋白(专利文献2：国际公开第2005/068495号小册子)。根据重组桑蚕，由于蜘蛛丝蛋白以蚕丝的形式被吐丝，因而不需要上述抽提、精制、纺丝等处理。

发明内容

但是，由现有的重组桑蚕制作的蚕丝的物性远远不及本来的蜘蛛丝的物性，强度不足。

因而，本发明的目的在于提供制作具有优异物性的蛋白质的重组生物以及由该重组生物制作的物性优异的蛋白质。另外，本发明的目的在于提供制作具有充分优异强度的蚕丝的重组桑蚕以及由该重组桑蚕制作的具有充分优异强度的蚕丝。

本发明人等为了达成上述目的进行了深入研究，结果发现当在被重组生物中导入横纹金蛛的基因时所得蛋白质的物性优异，从而完成了本发明。

即，本发明涉及导入有下述(i)～(iv)中任一种核酸的重组生物以及由上述重组生物制作的蛋白质。

(i)具有序列号1的碱基序列的核酸

(ii)编码具有序列号2的氨基酸序列的蛋白质的核酸

(iii)与上述(i)的核酸具有90％以上的序列同一性且编码牵引丝蛋白的核酸

(iv)在严格(stringent)的条件下与上述(i)的核酸的互补链杂交且编码牵引丝蛋白的核酸

通过导入上述特定的核酸，重组生物所制作的蛋白质变得含有很多蜘蛛蛋白，结果强度等物性变得优异。

特别是，本发明涉及导入有上述(i)～(iv)中任一种核酸的重组桑蚕、由上述重组桑蚕制作的蛋白质以及由上述重组桑蚕制作的蚕丝。通过将上述特定的核酸导入到桑蚕中，重组桑蚕所制作的蚕丝变得含有很多蜘蛛蛋白，结果变得具有充分的强度。

根据本发明，能够提供制作具有优异物性的蛋白质的重组生物以及由该重组生物制作的物性优异的蛋白质。另外，本发明还能够提供制作具有充分优异强度的蚕丝的重组桑蚕以及由该重组桑蚕制作的具有充分优异强度的蚕丝。

附图说明

图1为表示基因重组用载体质粒的结构的示意图。

图2为表示插入蜘蛛基因表达盒的位置的下游的桑蚕基因组序列的图。

图3为表示用SDS-PAGE将基因重组桑蚕所制作的蚕丝的蛋白质进行分离的结果的图。

图4为表示重组桑蚕(A)与非重组桑蚕(B)的蚕丝的扫描电子显微镜照片。

具体实施方式

以下根据需要一边参照附图一边详细地说明用于实施本发明的方式。但本发明并不限定于以下的实施方式。

本发明涉及导入有下述(i)～(iv)中任一种核酸的重组生物以及由上述重组生物制作的蛋白质。

(i)具有序列号1的碱基序列的核酸

(ii)编码具有序列号2的氨基酸序列的蛋白质的核酸

(iii)与上述(i)的核酸具有90％以上的序列同一性且编码牵引丝蛋白的核酸

(iv)在严格的条件下与上述(i)的核酸的互补链杂交且编码牵引丝蛋白的核酸

特别是，本发明涉及导入有上述(i)～(iv)中任一种核酸的重组桑蚕、由上述重组桑蚕制作的蛋白质以及由上述重组桑蚕制作的蚕丝。

具有序列号1的碱基序列的核酸就金蛛属横纹金蛛(Argiope bruennichi)而言是编码作为牵引丝(或经纱)蛋白主成分的MaSp1(大壶状腺丝蛋白1)蛋白的核酸，但只要是具有序列号1的碱基序列的核酸，则可以是由人工合成获得的核酸，也可以是从基因组文库或cDNA文库获得的核酸，还可以是用PCR对它们进行扩增而得到的核酸或者用限制酶将它们进行切断而得到的核酸。

序列号2的氨基酸序列是横纹金蛛的MaSp1蛋白所具有的氨基酸序列。