[发明专利]一种免疫层析试条用封闭剂组合物以及一种免疫层析试条

说明书

技术领域

本发明涉及免疫层析技术，具体涉及一种免疫层析试条用封闭剂组合物以及一种免疫层析试条。

背景技术

随着免疫诊断技术的发展，各种原材料以及各种检测手段的综合应用，技术越来越向小型、操作简单、快速、准确度高的方向发展。免疫层析技术是这发展当中非常重要的一个部分，它从空间、时间上改变了这一技术的发展方向，在空间上，它从以前的实验室搬到家庭，在时间上，它把几天才能够出检测结果缩短到几分钟出检测结果。因而大大推动了免疫诊断技术的快速发展。

免疫层析技术是利用抗原抗体高特异性、高灵敏性的反应原理，通过高效信号标记物标记抗体(或抗原)来检测抗原(或抗原)。在技术当中一个非常重要的技术难点就是抗原(或抗体)的固定材料，从目前解决的情况来看，一般选择以下几种固定材料：硝酸纤维素膜(NC膜)、尼纶膜、聚偏氟乙烯膜(PVDF)，因为这些膜都能够牢固的结合蛋白质，并且结合能力非常高。其中最常见的是NC膜，因为它结合蛋白质能力强，价格相对比较便宜。

NC膜虽然能够强有力的吸附抗原或者抗体，但是在检测生物样本过程中，由于生物样本中存在大量的其他生物大分子，这些生物大分子也能够非特异性吸附到NC膜上，因而严重干扰抗原抗体的识别能力，减低检测灵敏度。因此，需要找到一种技术解决抗原(或抗体)固定后，其他的生物大分子不会干扰抗原抗体反应的试剂

目前，有很多大量专利文献与学术文献报告过减低NC膜的背景干扰的问题，但是他们绝大部分是采用以下两种方法处理：

采用先在NC膜固定生物大分子，然后用有机高分子物质(如PVP、PEG、PVP)与表面活性剂结合进行封闭处理。采用先在NC膜固定生物大分子，然后用BSA、脱脂奶粉、酪蛋白或者各种血清蛋白(如羊血清等)单独处理或者与表面活性剂相结合处理。

NC膜经过上述几种方法处理后，使原本疏水的膜变得亲水，同时生物大分子在NC膜上的吸附能力大大降低，但是NC膜经过以上一系列处理后，也带来了很多问题：如因为表面活性剂的加入使原先固定在NC膜的蛋白质位置产生改变，蛋白质线出现弥散，原先固定在NC膜上的蛋白质量降低。其次由于NC膜在浸泡、干燥过程中发生一定的变化也使试条整个性能发生改变，再次对于试条生产工艺来说，这几种处理工艺非常麻烦，不利于生产工艺的放大。

因此，目前一般试条生产厂家大都选择购买经封闭处理后的NC膜，在生产试条时不需要进行额外的NC膜封闭处理。但是这种处理一般只解决了NC膜的亲水性能，NC膜吸附蛋白质的性能几乎没有发生改变，NC膜吸附蛋白质的能力还很强，膜上还存在大量蛋白质结合位点，因此很多试条生产厂家就在层析流动组分中加入BSA、表面活性剂进行再次封闭处理，以达到降低NC膜的检测背景，但是这种处理方法并不太理想。

层析试条一般是由这几部分组成：样品垫、NC膜、吸水垫。当样品垫中加入被检测物时，被检测物随着溶液的流动与免疫颗粒反应，然后随着液体的流动，免疫颗粒与固定在NC膜的抗原或者抗体再反应，没有反应的颗粒最后被吸水垫收集。大多数文献报道是在样品垫中加入BSA与表面活性剂以解决降低NC膜背景高的问题，如发明人张涛(专利号：01126931.6，专利名：“应用流动封闭技术的免疫金检测试剂盒”)报告了一种封闭处理技术，他是在样品垫中加入封闭剂(封闭剂配方是：脱脂奶粉、BSA、PVP、吐温20)，当加入样品时，样品垫中的封闭剂释放出来，起到封闭效果。这种封闭处理方法确实解决了胶体金层析试条上NC膜的封闭问题，但是这种方法对于乳胶颗粒的层析试条来说是不能够封闭NC膜对乳胶颗粒的非特异性吸附问题，可能是因为乳胶颗粒疏水性比胶体金颗粒疏水性更强、颗粒粒径更大，从而导致乳胶颗粒经常在NC膜前端出现“死金”现象，因此沿用胶体金封闭处理方法并不理想。需要找到更合适的封闭试剂组份及方法来解决这个问题。同时目前还未报道过试条长期存储后的封闭剂保护问题，因为封闭剂具有生物活性，容易失活；因此需要添加一些蛋白质保护剂，从而达到试条性能的长期保存。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供一种能够降低试条背景的免疫层析试条用封闭剂组合物以及一种背景较低的免疫层析试条。

为了解决现有技术问题，本发明提供了一种免疫层析试条用封闭剂组合物，包括：

蛋白、蛋白保护剂、表面活性剂和第一缓冲溶液；

其中，所述蛋白为酪蛋白、酪蛋白处理液、甲基化牛血清白蛋白、人血清白蛋白；所述蛋白保护剂为糖类。