[发明专利]一种利用活性碳柱层析和结晶技术提取纯化梓醇的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种从中药鲜地黄块根中分离制备梓醇的方法。

背景技术

地黄为常用中药，2010年版《中国药典》一部的成方制剂中有近二百种(194种)选用了地黄，是我国著名的“四大怀药”道地药材之一，地黄来源于玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根，具清热凉血、养阴、生津之功效^[1]。

我们课题组成员长期从事地黄化学成分和药理学研究，先后承担了国家七.五攻关课题“常用中药材地黄品种整理和质量研究”、国家九.五攻关课题“地黄质量标准规范化研究”(NO：969030204)、国家青年基金课题“标准物质地黄甙D的研究”(NO：95Y3411，合同：95C018)、河南省自然基金课题“鲜地黄与地黄、熟地黄有效成分比较研究”(NO：0111021700)、“中药地黄、白芷、连翘标准品的研究”(NO：0511043800)以及国家自然科学基金“地黄一源三性物质基础及血清相关性的比较研究”(编号：30873442)等一系列有关中药“地黄”的国家和省级科研课题，对地黄中环烯醚萜苷类成分进行了系统的分离鉴定研究，并大量的富集制备了梓醇等标准品，为地黄的质量控制及药效学评价奠定了基础。其结构如下：

经研究发现，梓醇属于7，8-环氧醚型环烯醚萜苷类化合物，其4-位无取代基，1-位上的羟基与糖缩合成单糖苷，它是中药地黄中降血糖作用的有效成分，并有很好的利尿作用和迟发性的缓下作用，这些都与地黄药效相一致。近年来，国内学者报道了梓醇具有改善东莨菪碱诱导的学习记忆障碍^[2]、抗脑缺血损伤促神经修复和重塑^[3]、抗老年性痴呆改善记忆^[4]和治疗骨质疏松^[5]等等多种药理活性。同时，梓醇也是地黄的指标性成分，2010年版《中国药典》一部规定生地黄药材按干燥品计算含梓醇不得少于0.20％^[1]。

现有标准品梓醇系我们在国家七五期间及河南省自然基金课题研究成果，已经推广应用于地黄药材的质量控制。我们曾对梓醇成分进行分离制备，研究发现梓醇分子量不大，在溶解性方面偏于亲水性，易溶于水和甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇，难溶于氯仿、苯、石油醚等亲脂性有机溶媒，但其热稳定性较差，对酸很敏感，苷键易为酸水解断裂，所得苷元因具有半缩醛结构，性质活泼容易进一步发生氧化聚合等反应。从鲜品加工成生地黄及熟地黄，梓醇的含量降低至原来的1/10^[6-11]。

对于梓醇的分离和提取，其它已有的报道多集中在从地黄中溶出梓醇方面，包括所用溶剂、提取时间、提取方法等因素^[12-14]；王明道^[15-16]等采用了酶法和微波辅助进行怀地黄梓醇的提取工艺研究；樊海燕^[17]、张秀丽^[18]等采用了大孔吸附树脂方法分离纯化梓醇；温学森^[19]、张发成^[20]、刘东锋^[21]等亦采用大孔吸附树脂分离纯化的必备步骤对鲜地黄中的梓醇进行制备。为了寻找一种更适宜工业化生产的方法，我们在相关课题资助下，经多年的试验和研究，优选了活性碳柱层析同时灵活运用多种结晶手段等方法用于梓醇的分离纯化，经反复验证表明工艺稳定、可靠。

活性炭是一种孔结构发达、比表面积巨大的含碳物质，具有吸附量大、再生简单、成本低等特点，活性炭广泛应用于天然产物有效成分的分离，是分离有机化合物，尤其是水溶性化合物的有效手段，在天然产物化学成分的提纯等方面显示了独特的优势，王贤纯^[22]、皮文霞^[23]、张虎极^[24]等采用活性炭柱层析法已经成功分离纯化了姜黄素、山茱萸总苷和莽草酸。

结晶技术作为一种制备纯物质的有效方法之一，在传统医药化工生产中一直占有相当重要的位置。与其他分离方法相比，结晶法具有产品纯度高、能量消耗少、操作温度低、对设备腐蚀程度小、操作简单、成本低等特点，应用非常广泛。

迄今，未见涉及以地黄新鲜块根为原料，采用活性碳柱层析分离纯化的方法，同时灵活运用多种结晶等技术分离制备梓醇的专利报道。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京：中国医药科技出版社，2010：115.