[发明专利]抗Aβ42肽的单克隆抗体及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域。本发明涉及用于早期检测和治疗老年性痴呆(Alzheimer’sDisease.AD)的抗体。具体而言，本发明涉及抗老年痴呆症主要靶蛋白Aβ42肽的单克隆抗体及其应用。

发明背景

老年性痴呆(Alzheimer’s Disease.AD)是一种渐进性神经退化性疾病，其主要表现为记忆功能衰减及识别能力障碍，同时伴有各种神经症状和行为障碍，具有非常高的发病率。自1907年德国医生Alois Alzheimer首次报道AD的症状和病理至今已近一个世纪，AD的确切致病机理仍无定论。

研究发现，AD的主要病理表现有脑内细胞外的老年斑(senile plaques)沉积、细胞内的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles，NFT)以及胆碱功能缺损等，最终造成神经元损伤和坏死并最终导致海绵脑病。1984年，Glenner和Wong(1984，Biochem Biophys Res Commun，120(3)：885-890)发现老年斑的主要成分是一种由39至43个氨基酸残基组成的具有折叠构型的多肽，相对分子质量约4200，称为β-淀粉样蛋白(β-amyloid，Aβ)。1992年，Hardy和Higgins(1992，Science，256(5054)：184-185)提出了“Aβ级联假说(amyloid cascade hypothesis)”，认为Aβ的聚集和沉积能加剧神经原纤维的缠结，并导致细胞死亡，是AD形成的最主要原因。Aβ沉积发生在AD早期，且与正常大脑相比，AD患者大脑中的Aβ沉积更为严重和广泛，而Aβ本身能引起氧化应激、细胞凋亡以及轴突生长异常等神经病理学变化，提示Aβ在AD的产生与发展中具有重要作用。Aβ沉积主要集中在小胶质细胞周围，并刺激小胶质细胞释放炎症因子，发生炎症反应，这种慢性炎症反应能够引起细胞的裂解并释放具有反应活性的氧化性物质，从而削弱了吞噬细胞的吞噬作用，这样更加剧了Aβ的沉积。

A β蛋白在大脑内积聚形成纤维和斑块(俗称老年斑)，造成神经元损伤和坏死并最终导致海绵脑病。Aβ是淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)正常代谢的产物之一。APP基因位于人类第21号染色体长臂，由至少18个外显子编码，Aβ的编码序列位于第16、17个外显子。APP主要有两条代谢途径：一是α-分泌酶在687与688氨基酸之间切割，将APP氨基末端671个氨基酸的可溶性多肽sAPPα释放到胞外，由于切割位点在Aβ序列内，因此不产生完整的Aβ片段；另一条途径是经β-分泌酶在671与672氨基酸之间切割，然后由g-分泌酶在APP的跨膜区切割，释放出Aβ40、Aβ42、Aβ43，正常情况下多数为Aβ40(90％)，只有少量Aβ42和Aβ43产生。Wiltfang等(2007，Journal ofNeurochemistry，101(4)：1053-1059)发现，Aβ40肽和Aβ42肽的比例失调，是造成老年痴呆的重要原因之一。

APP的代谢和Aβ的产生受到多种因素的调节。对早期发病AD的遗传学研究发现，大部分AD与第21号染色体上的APP基因突变相关，为揭示Aβ和APP在AD病理发展中的作用提供了强有力的证据。AD突变位于APP的第670和671密码子，能增强β-分泌酶的活性。突变位于APP的第612个密码子，能抑制α-分泌酶的剪切活性。这两种突变的结果使更多的APP由β-分泌酶途径代谢，产生大量的Aβ。