[发明专利]一种用人工蛋白类荧光探针对活细胞进行细胞质特异性标记的方法

权利要求书

1.一种用人工蛋白类荧光探针对活细胞进行细胞质特异性标记的方法，其特征在于包括：

配制氨基酸-壳聚糖多肽类接枝共聚物悬液；

将配制好的接枝共聚物悬液分散于DMEM高糖培养液中；

用乙二胺四乙酸-胰蛋白酶把中国仓鼠肺成纤维细胞细胞消化为单细胞悬液；

孵育所述中国仓鼠肺成纤维细胞细胞；

弃掉原液；

加入分散有接枝共聚物悬液的所述DMEM高糖培养液；

继续培养预定的时间。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于进一步包括：

在所述继续培养预定的时间的步骤之后，在紫外光的激发下，用荧光显微镜观察被蛋白类荧光探针标记的中国仓鼠肺成纤维细胞。

3.根据权利要求1的方法，其特征在于

所述配制氨基酸-壳聚糖多肽类接枝共聚物悬液的步骤包括：

将氨基酸-壳聚糖多肽类接枝共聚物固体粉末通过紫外灭菌后加入适量灭菌水，

所述将配制好的接枝共聚物悬液分散于DMEM高糖培养液中的步骤包括：

用超声器超声分散，

将分散好的接枝共聚物水溶液分散于DMEM高糖培养液中。

4.根据权利要求3的方法，其特征在于

在所述用超声器超声分散的步骤中，保持超声器每工作一定时间后停歇一个预定时间。

5.根据权利要求1的方法，其特征在于

所述用乙二胺四乙酸-胰蛋白酶把中国仓鼠肺成纤维细胞消化为单细胞悬液的步骤包括：

用DMEM高糖培养液培养中国仓鼠肺成纤维细胞，培养至细胞铺满培养瓶一个预定比例以上时，用乙二胺四乙酸-胰蛋白酶消化为单细胞悬液，

所述孵育所述中国仓鼠肺成纤维细胞的步骤包括：

在培养箱中孵育，使细胞正常贴壁生长，得到所需的细胞生长状态。

6.根据权利要求2的方法，其特征在于进一步包括：

在所述用荧光显微镜观察被蛋白类荧光探针标记的中国仓鼠肺成纤维细胞的步骤之前，用磷酸缓冲液冲洗掉残留的蛋白类荧光探针。

7.根据权利要求5的方法，其特征在于：

所述乙二胺四乙酸-胰蛋白酶的体积比为0.25％，

所述在培养箱中孵育的步骤是在37℃、5％体积分数的CO₂环境下进行。