[发明专利]一株经航天育种技术选育的枯草芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一株经航天育种技术选育的枯草芽孢杆菌，其特征在于：该菌株命名为枯草芽孢杆菌N9-1-35，已于2011年08月31日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为：CCTCC M 2011301。

2.根据权利要求1所述的一株经航天育种技术选育的枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌N9-1-35的菌落呈圆形或不规则性，边缘不整齐，表面有皱褶、粗糙，污白色或微带黄色，有隆起；该菌种细胞大小为0.3μm～0.5μm×1.4μm～3.0μm，呈杆状，革兰氏阳性；芽孢椭圆形，大小为0.6μm～0.9μm×1.0μm～1.5μm，孢囊不膨大，有运动性；能利用葡萄糖、木糖及阿拉伯糖等，能水解淀粉，还原硝酸盐；在含7％氯化钠的培养基上能够生长，在50℃下培养能够生长，V-P反应呈阳性，在厌氧条件下不生长。

3.权利要求1所述的一株经航天育种技术选育的枯草芽孢杆菌在生产制备产酶益生素中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：制备产酶益生素的方法为：枯草芽孢杆菌N9-1-35经发酵处理，得到发酵液，然后加入玉米淀粉通过喷雾干燥制成枯草芽孢杆菌菌粉，再复配乳酸链球菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉及玉米淀粉，即得产酶益生素。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述制备枯草芽孢杆菌菌粉的具体步骤如下：

(i)菌种：选用枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis N9-1-35；

(ii)斜面培养：将菌种一环接种于固体斜面培养基上，在37℃下培养18～24h；

(iii)一级种子培养：取上述培养好的斜面，在无菌条件下用接种环取一环接种于50mL～100mL种子液体培养基中，在37℃条件下，静置培养12～16h，制得一级种子液；

(iv)扩大培养：以2％的接种量，将一级种子液接于500mL～1000mL种子液体培养基中，在37℃条件下，静置培养8～14h，制得二级种子液；

(v)发酵罐培养：以2％的接种量，将二级种子液接于液体发酵培养基中，于37℃条件下，通气培养22～28h；

(vi)收集发酵产物：待步骤(v)芽孢率达到90％以上时，收集发酵液；

(vii)向发酵液中加入4～8％玉米淀粉，立即喷雾干燥，制得菌粉。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述步骤(iii)、(iv)中的种子液体培养基配方为：葡萄糖5g/L，蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，氯化钠5g/L，使用时，调节pH至7.0～7.5，115℃条件下灭菌20min；所述步骤(ii)中的固体斜面培养基为上述种子液体培养基中添加1.5～2.0％的琼脂粉；所述步骤(v)中的液体发酵培养基配方为：玉米粉60g/L，豆粕30g/L，磷酸氢二钠6g/L，硫酸铵3g/L，氯化钙2g/L，pH 7.0～7.5。

7.一种产酶益生素，其特征在于：由枯草芽孢杆菌菌粉、乳酸链球菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉及玉米淀粉组成。

8.根据权利要求7所述的产酶益生素，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌菌粉、乳酸链球菌菌粉、嗜酸乳杆菌菌粉及玉米淀粉的质量比为6∶2∶1∶21，枯草芽孢杆菌、乳酸链球菌和嗜酸乳杆菌的活菌数分别大于或者等于3×10⁸cfu/g、1×10⁸cfu/g和5×10⁷cfu/g。