[发明专利]一种胰蛋白酶水解鱿鱼皮提取胶原蛋白肽的方法

说明书

技术领域

本发明生物技术中蛋白质材料领域，具体涉及胰蛋白酶水解鱿鱼皮提取胶原蛋白肽的方法。

背景技术

胶原蛋白在医药、保健、食品及美容等领域已获得了广泛的应用(Phanat Kitfphattanabawon，Soottawat Benjakul.Characterisation of acid-soluble collagen from skin and bone of bigeye snapper(Priacanthus tayenus)[J].Food Chemistry，2005，89：363-372.)。目前所利用的胶原蛋白主要是从陆生动物的结缔组织中提取。近年来疯牛病、疯羊病、口蹄疫、禽感感等疾病不断出现，陆生动物来源的胶原蛋白在应用方面受到了极大限制(Phanat Kitfphattanabawon，Soottawat Benjakul.Characterisation of acid-soluble collagen from skin and bone of bigeye snapper(Priacanthus tayenus)[J].Food Chemistry，2005，89：363-372.)。因此，水产动物胶原蛋白的开发和应用已引起了广泛重视。生物活性肽的保健功能和药理作用是目前研究的热点。通过蛋白酶定向水解得到的胶原蛋白活性肽，具有特殊的生理功效，主要体现在免疫调节、抗氧化、抑菌、活化细胞及促进皮肤和胶原蛋白合成等方面(Nokos K，A lexis J A.Chondroitin proteoglycans from squid skin-isolation，characterization and immunological studies[J].EurJB iochem，1990，192：33-38.)。鱿鱼为软体动物门、头足纲、枪乌贼科海产动物，分布广泛。随着我国海洋鱿钓业的迅速发展，鱿鱼已成为我国主要的水产加工原料(曾庆祝，许庆陵，等.鱿鱼皮胶原蛋白的功能特性[J].水产学报.2009，33(1)：139-144.)。鱿鱼年加工量约为30～40万吨，在加工过程中会产生包括头、足、内脏及表皮等废弃物，其中鱿鱼皮占加工量的8％-13％，但大部分被制成低附加值的鱼粉或者直接丢弃。

本实验鉴于鱿鱼皮中胶原蛋白含量丰富(约为其干重的70％-80％)和资源利用率低这一现状，开展胶原蛋白肽的制备工艺研究，为进一步开发以鱼皮胶原蛋白活性肽为基料医用食品、化妆品和保健品提供技术支撑，并提高企业的经济效益。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种胰蛋白酶水解鱿鱼皮提取胶原蛋白肽的方法，对提取工艺进行优化，具有提取工艺简单、酶解效果好的特点。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种胰蛋白酶水解鱿鱼皮提取胶原蛋白肽的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)原料预处理：把鱿鱼皮用水洗净捞出，切碎，放入稀碱水中浸泡以去除鱿鱼皮上的杂蛋白，然后将处理好的鱿鱼皮放入HAc水溶液中溶解去除鱿鱼皮上的脂肪及溶胶；

2)将预处理好的脱脂鱿鱼皮按鱿鱼皮湿重的2～4倍加水，调节pH值在7.5～8.5，按原料中鱿鱼皮重量的4～6％加入胰蛋白酶，在45～55℃下恒温酶解7～9h；

3)酶解完毕后，灭酶、过滤，取上清液浓缩，真空干燥得鱿鱼皮胶原蛋白肽产品。

作为优选，所述步骤1)的稀碱水采用质量浓度为0.8～1.2‰NaOH水溶液，鱿鱼皮在NaOH水溶液中浸泡时间20～28h，并且至少连续重复三次。

优选，所述步骤1)的HAc水溶液的质量浓度为0.8～1.2‰，温度为40～50℃。

再优选，所述步骤2)的pH值为8，胰蛋白酶的加入量为原料中鱿鱼皮重量的5％，在50℃下恒温酶解8h。

最后，所述步骤3)的灭酶是在95～105℃下处理8～12min。

与现有技术相比，本发明的优点在于：以鱿鱼加工后的废弃鱿鱼皮作为原料采用酶法提取胶原蛋白肽，不仅资源丰富、成本低，还可以减少对环境的污染，提高水产品加工利用水平；同时提取工艺简单、酶解效果好，鱿鱼皮胶原蛋白肽水解度可达26.1％，清除羟自由基率为79.8％，制得的鱿鱼皮胶原蛋白肽可作为基料应用于医用食品、化妆品和保健品等领域。

附图说明

图1是pH对水解度和清除羟自由基率的影响；

图2是温度对水解度和清除羟自由基率的影响；

图3是加酶量对水解度和清除羟自由基率的影响；