[发明专利]基因表达的定量有效
申请号: | 201110282737.3 | 申请日: | 2003-09-05 |
公开(公告)号: | CN102344960A | 公开(公告)日: | 2012-02-08 |
发明(设计)人: | C·R·坎托尔;C·丁 | 申请(专利权)人: | 波士顿大学信托人 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李进;刘健 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因 表达 定量 | ||
1.一种测定生物样品中靶核酸序列的数量的方法,包括下列步骤:
a)通过加入已知量的标准核酸来制备样品,该标准核酸具有与包含靶核酸的生物标本的靶核酸序列相比至少有一个碱基不同的核苷酸序列,由此在靶和标准核酸之间产生区别位点;
b)扩增步骤a)的样品;
c)增加该标准和该靶核酸序列之间在区别位点处的差异;以及
d)通过测量扩增的靶核酸与扩增的标准核酸的比率来定量步骤
c)的增加的产物,以测量存在于生物样品中的靶核酸序列的数量。
2.权利要求1的方法,其中靶核酸来自于传染物。
3.权利要求1的方法,其中靶核酸是mRNA转录本。
4.权利要求1的方法,其中利用MALDI-TOF质谱法进行定量。
5.权利要求1的方法,其中利用在区别位点处的引物延伸进行步骤c)。
6.权利要求1的方法,其中利用在区别位点处的等位基因特异的酶裂解进行步骤c)。
7.权利要求1的方法,其中利用在区别位点处的等位基因特异的杂交进行步骤c)。
8.权利要求1、5、6、和7的方法,其中利用MALDI-TOF质谱法进行定量。
9.一种试剂盒,包括包含在试管中的、至少一种设计成与至少一种相应的靶核酸不同的标准核酸,以及关于如何使用标准物根据权利要求1的方法定量核酸样品中相应靶核酸的数量的用法说明。
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