[发明专利]金乌贼胚胎细胞染色体标本制备方法

权利要求书

1.一种利用金乌贼胚胎细胞制备染色体标本的方法，它的操作程序是剥膜、前处理、低渗处理、固定、解离、滴片、染色以及洗片，其特征在于所述的滴片采用热滴片法，温度40℃-60℃，滴片高度1.8m-2m，每滴完一滴后用吸水纸在液滴中间位置吸除多余的液体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的剥膜：使用镊子固定卵，用解剖针挑破卵膜；然后双手各持一镊子从破膜开口处外翻卵膜，逐渐剥离卵膜，露出胚胎；

所述的前处理：剥膜后的胚胎采用秋水仙素进行前处理，将胚胎细胞浸入0.04％的秋水仙素溶液中处理30min；

所述的低渗处理：采用KCl作为低渗液，浓度为5％，处理45min，低渗处理前去净秋水仙素；

所述的固定：采用卡诺氏液，即甲醇：冰醋酸＝3∶1(体积比)固定，间隔15min更换固定液一次，共更换3次固定液，第一次加固定液前需移除一半低渗液；

所述的解离：采用浓度为50％冰醋酸进行解离45min，解离前去净固定液；

所述的滴片：采用热滴片法，温度40℃-60℃，滴片高度1.8m-2m，每滴完一滴后用吸水纸在液滴中间位置吸除多余的液体；

所述的染色：采用10％Giemsa染液染色，即Giemsa原液1ml，PH 6.8的磷酸缓冲液9ml，染色时间30min；

所述的洗片：用自来水冲洗玻片，冲洗时有液滴的面朝上，玻片向下倾斜，玻片下端与水平面成30°，玻片磨砂面与水流接触，水流以滴刚成线状，慢慢冲洗，至冲洗后的水不再带有颜色为止。