[发明专利]环烯醚萜类化合物梓苷的制备方法及抗癌用途

说明书

一、发明内容：

本发明提供了具有医药价值的梓苷的制备方法及抗癌活性。其分离方法和结晶方法快捷、简单、实用。与以往的技术比较，方法新颖，具有明显的创新性。 

本发明提供了梓苷的提取、分离、纯化的方法是，取梓Catalpa ovata G.Don、黄金树C.speciosa Ward.、楸C.bungei C A.Mey.的鲜(或干)果实或茎皮(梓白皮)，或者其粉碎品，用水、甲醇、乙醇、丙酮等溶剂或其二种、多种混合溶剂提取，提取液70℃以下真空浓缩至干(或无有机溶剂)，加水至合适的体积，去除沉淀(如有沉淀)，上常规处理好的吸附柱，用水洗去杂质，至近无色，再用5-10％的乙醇(或甲醇)洗脱，接着用15-50％的乙醇(或甲醇)洗脱，并收集此部分洗脱液，70℃以下真空浓缩至干(或无有机溶剂)，加水至合适的体积，用适量活性炭脱色，脱色后的溶液70℃以下真空浓缩至干，即得梓苷粗品，梓苷粗品加适量20％的乙醇(或20％甲醇、20％丙酮)，洗去色素，固体用无水溶剂如甲醇、乙醇、丙酮或者是混合液，或者是它们与氯仿(或乙酸乙酯)的混合液溶解，后加入适量氯仿(或乙酸乙酯)，放置使其结晶和重结晶。 

本发明还涉及对梓苷的抗癌活性筛选，发现在小鼠移植性肿瘤试验中，当剂量为6.25、12.50、25.00mg/Kg时，对肉瘤S180和肝癌(Heps)的平均抑制率分别达53.31％、60.26％、60.68％和32.23％、47.47％、50.80％，P值＜0.001，有明显的抗癌活性，具有良好的开发前景。 

1、上述从原药材提取含有梓苷的浸膏所用的溶剂可以是水、乙醇、甲醇、丙酮，即可以单独使用，也可以二种或二种以上的溶剂合并使用。 

2、上述从原药材提取含有梓苷的浸膏可以用回流提取，也可以用渗漉提取或者用索氏提取器提取。 

3、上述填充吸附柱所用的填料可以是非极性或弱极性的树脂，例如：苯乙烯型(包括甲基苯乙烯型、乙基苯乙烯型)或者丙烯腈型共聚体树脂，也可以是活性炭。 

二、梓苷的结构鉴定 

紫葳科(Bignoniaceae)梓属(Catalpa L.)植物产于湖南、河北、四川、东北等地，树皮习称梓白皮，果实称梓实，均供药用，《本草钢目》记载具有清热、解毒、致泻、杀三虫和利尿的功能。近代药理研究表明除利尿外尚有抗痉挛、降血糖、抗饱胀感和增强抗癌药作用的功效，梓实中主要活性成分为梓醇和梓苷。 

梓苷的化学结构式 

白色针晶(甲醇)，m.p.145-146℃，[α]23D：(C＝1.0，MeOH)可溶于甲醇、水、丙酮、吡啶和二甲基亚砜，微溶于氯仿、乙酸乙酯，不溶于石油醚。 260(4.27)，303。红外光谱显示有羟基(3409cm^-1，宽峰)、酯羰基(1698cm^-1)、双键(1653cm^-1)、苯环(1607cm^-1，1515cm^-1)、和苷键(1065cm^-1，宽峰)、1279cm^-1、928cm^-1、860cm^-1为环氧的ν_c-o吸收。电喷雾质谱(API-ESI(+)MS)显示该化合物的准分子离子峰为505[M+Na]⁺(100)，表明其分子量为482。506[M+H+Na](25)、302[M-OH-Glu](35)。Molisch反应呈阳性，说明有糖的存在，为苷类化合物。¹³C-NMR和¹H-NMR显示碳数和氢数分别为22与26，结合质谱可推出其分子式为C₂₂H₂₆O₁₂，MW482(计算值482.1423)。¹H-NMRδ4.62(1H，d，J＝7.8Hz)和¹³C-NMRδ98.05ppm分别是糖端基质子信号和糖端基碳信号，进一步证明糖和苷键的存在，且为β-苷键，薄层层析5％-10％H₂SO₄-EtOH液显灰褐色斑点，综上所述提示该化合物可能为环烯醚萜苷类。