[发明专利]一种灰毡毛忍冬绿原酸酯皂苷及其制备方法和用途

说明书

一、技术领域：

本发明涉及天然药物化学领域，公开了从灰毡毛忍冬花蕾中提取分离的一种新忍冬绿原酸酯皂苷类化合物，以及该化合物的制备方法和在医药领域中的用途，尤其在制备基质金属蛋白酶-2/9抑制剂抗肿瘤药物的用途。

二、技术背景：

忍冬属植物中富含绿原酸类和齐墩果酸型皂苷类成分。绿原酸具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用；近年有报道表明绿原酸有较强的抑制基质金属蛋白酶-2/9(MMP-9)的活性(Un-Ho，J.，et al.Life Sciences，2005，77：2760-2769)。齐墩果酸型皂苷类成分也是一种重要的生物活性物质，这些皂苷报道有抑制肿瘤增殖活性(Bang SC，et al.Chem Pharm Bull，2005，53：1451-1454)活性。灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)为忍冬科忍冬属植物，具有清热解毒、抗菌消炎的功效，在中医临床及民间广泛应用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温热发病等疾病的治疗。2005年版《中国药典》收载，将其与红腺忍冬、华南忍冬一同列入山银花项下。江苏省中国科学院植物研究所在对灰毡毛忍冬花蕾中皂苷类成分的研究过程中，得到一种新的绿原酸酯皂苷类化合物，命名为Lonimacranthoide VII，同时具有抑制肿瘤增殖(IC₅₀＝41.37μM)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)(IC₅₀＝6.23μM)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)(IC₅₀＝7.05μM)活性；在体内试验中，Lonimacranthoide VII高中低剂量组(2.5、5.0和7.5mg/kg)均可明显抑制小鼠黑色素瘤B16/BL6肺转移灶数。有望开发成一类新的同时防治肿瘤生长和转移的抗癌药物。

三、发明内容：

本发明公开了一种绿原酸酯皂苷类化合物，简称Lonimacranthoide VII，分子式为：C₅₇H₈₂O₂₀，分子量：1086，化学名为：

3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl hederagenin 23-O-chlorogenic acylester，化学结构式为：

上述化合物的制备方法，其特征在于以灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoidesHand.-Mazz.)花蕾为原料，经水、甲醇、乙醇、甲醇-水混合溶液或乙醇-水混合溶液提取；水提取液直接过大孔树脂吸附，甲醇、乙醇、甲醇-水混合溶液或乙醇-水混合溶液的提取液浓缩后加水溶解过大孔树脂吸附；大孔树脂吸附物经柱层析分离而得。其中，大孔树脂包括D101、AB-8或HP-20；柱层析用担体选自硅胶、凝胶和反相硅胶中的一种或几种制得。

本发明的新绿原酸酯皂苷Lonimacranthoide VII与医学上可接受的药用辅料组成药物组合物及其制剂。如，片剂、胶囊剂、以及注射剂。

本发明提供了新绿原酸酯皂苷Lonimacranthoide VII制备基质金属蛋白酶-2/9抑制剂及抗肿瘤药物的用途。在体外，LonimacranthoideVII抑制肿瘤增殖的IC₅₀为41.37μM、抑制基质金属蛋白酶2(MMP-2)的IC₅₀为6.23μM、抑制基质金属蛋白酶9(MMP-9)的IC₅₀为7.05μM。体内，当Lonimacranthoide VII剂量为2.5、5和7.5mg/kg时对小鼠B16/BL6细胞静脉注射肺转移的抑制率分别为43.5％、52.9％和75.2％。

四、附图说明：

以下图可作为附件材料上报。

图1、新忍冬绿原酸酯皂苷Lonimacranthoide VII的结构式

图2、化合物(I)的主要HMBC相关关系

图3、化合物(I)的ESI-MS谱

图4、化合物(I)的¹H-NMR谱

图5、化合物(I)的¹³C-NMR谱

图6、化合物(I)的HMQC谱

图7、化合物(I)的HMBC谱

五、具体实施方式：