[发明专利]一种从蔓越橘中提取分离锦葵花素-3-O-葡萄糖苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从北美蔓越橘中提取分离锦葵花素-3-O-葡萄糖苷的方法，特别是一种通过大孔吸附树脂柱层析技术粗分，再过聚酰胺粉末柱进行分离纯化的方法，分离花青素单体成分等天然活性成分的方法。

背景技术

蔓越橘是小果类果树品种之一，属杜鹃花科越橘属。果实为鲜红色，果酸而脆。原产于北美，集中于美国的马萨诸塞州。与沙棘、野蔷薇、桑椹、悬钩子等野生灌木果类并称第三代水果，其果体虽小，但维生素、氨基酸及微量元素含量很高。蔓越橘因其保健功效和医疗价值，在发达国家很受重视，在法国、美国、日本、德国、瑞士等国销量都很大，且呈上升趋势。我国也在发展这些果品，需求量也在逐年增长。

花青素(Anthocyanidins)属酚类化合物中的类黄酮类，是一种水溶性色素，广泛存在于植物花瓣、果实的组织中及茎叶的表面细胞与下表皮层。其色泽随pH不同而改变，由此赋予了自然界许多植物明亮而鲜艳的颜色。在自然状态下，花青素在植物体内常与各种单糖结合形成糖苷，称为花色苷(Anthocyanin)，该命名是由Marguart(1853)命名矢车菊花朵中的蓝色提取物时提出来的，现在作为同类物质的总称。现有资料表明花青素有二十余种，在植物中常见的有六种，即天竺葵色素(Pg)、矢车菊色素(Cy)、飞燕草色素(Dp)、芍药色素(Pn)、牵牛花色素(Pt)和锦葵色素(My) 。

有机溶剂萃取法是目前国内外最广泛使用的提取花青素素的方法。多数选择甲醇、乙酮、丙酮等混合溶剂对材料进行溶解过滤，通过调节溶液酸碱度萃取滤液中的花青素。国内吴信子等用盐酸一甲醇溶液提取。目前，有机溶剂萃取法已成功地应用于诸如葡萄皮、桑椹、蓝莓等绝大多数含花青素物质的提取分离。有机溶剂萃取法的关键是选择有效溶剂，要求既要对被提取的有效成分有较大溶解度，又要避免大量杂质的溶解。该方法原理简单，对设备求较低，不足之处是大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。

近些年来，国外对于蔓越橘的研究大多集中在其果汁的药理作用研究上，研究证实蔓越橘抑制细菌黏附的活性，可以在很大程度上预防尿路感染发生，体外实验证实蔓越橘汁可以抑制LDL的氧化修饰，促进心血管健康，并能有效地清除自由基、延缓衰老，具有抗肿瘤的功效；但体外的抗氧化和抗肿瘤作用是否能在体内发挥实效还需要临床试验验证。

国内方面，凡建礼等公开了一种蔓越橘果实中花色苷和原花青素类成分的提取方法，方法采用酶解提取，大孔树脂吸附醇洗脱的技术，得到花色苷和原花青素类成分的混合物并未明确其中花色苷成分的含量，更未提及其中是否含有锦葵花素-3-O-葡萄糖苷以及含量。

发明内容

本发明的目的是提供一种从北美蔓越橘中提取分离锦葵花素-3-O-葡萄糖苷的方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种从北美蔓越橘中提取分离锦葵花素-3-O-葡萄糖苷的方法，包括如下步骤：

 （1）将蔓越橘冻果解冻,以原料重量6～8倍纯化水或乙醇水溶液，热回流提取3次,每次1小时；

（2）三次提取液合并，真空浓缩，回收乙醇，得到蔓越橘提取药液；

（3）提取药液过吸附型大孔树脂层析柱，用去离子水冲洗，用30～95%（体积分数）乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，真空浓缩至无醇；

（4）上述液体过60～100目聚酰胺粉末层析柱，用去离子水冲洗，分别用30～60%（体积分数）和60～95%（体积分数）的乙醇水溶液洗脱，分别收集洗脱液，

（5）两部分洗脱液分别真空浓缩至糖度40°,浓缩膏喷雾干燥，即得本品组分ⅠⅡ。

所述蔓越橘为自原产地采摘后,立即采用速冻技术制成的冻果。

所述步骤（1）提取用的乙醇水溶液中乙醇的体积分数优选为40～60%。

所述步骤（3）吸附型大孔树脂优选为AB-8型、HP-20、HPD-300、XAD-6型树脂。

所述步骤（3）用于洗脱的乙醇水溶液体积分数优选为50～70%，其用量优选为2～4倍柱体积。

所述步骤（4）用于洗脱组分Ⅰ的乙醇水溶液的体积分数优选为30～40%，其用量优选为1～2倍柱体积。

所述步骤（4）用于洗脱组分Ⅱ的乙醇水溶液的体积分数优选为60～70%，其用量优选为1～3倍柱体积。

本发明的优点是：

1、本发明提供了一种提取分离锦葵花素-3-O-葡萄糖苷的新的植物来源和提取分离方法；