[发明专利]一种包埋-交联磷脂酶A1聚集体的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种固定化磷脂酶的方法。 

背景技术：

磷脂酶A₁在磷脂改性、油脂精炼等方面有广泛应用，但游离磷脂酶A₁价格昂贵，且不易回收，催化水解时条件苛刻；与游离酶相比，固定化酶在保持其高效、专一及温和的酶催化反应特性同时，还呈现贮存稳定性高、分离回收容易、可多次重复使用、操作连续可控、工艺简便等优点。 

交联酶聚集体(CLEAs)，是一类新型的固定化酶技术，具有制备简单、酶活回收率高、操作和保存稳定性强等优点，被广泛运用于固定化酶的制备中。近年来，CLEAs技术与材料学、印迹工程、介质工程、反应工程学等相结合取得了一系列新进展，包括载体固定化CLEAs、包埋CLEAs、印迹法CLEAs、多酶CLEAs、CLEAs膜浆反应器等，在手性分子拆分与合成、抗生素生产等领域取得了一些成果。有些酶的CLEAs相对游离酶的酶活回收率竟超过100％，某些脂酶的交联酶聚集体活性甚至可提高10倍以上。但是由于其不易回收等缺点，使酶的重复利用率降低，因此为得到活力高且回收率高的固定化酶。 

发明内容

本发明是针对固定化磷脂酶A₁活性低等问题，而提出的用包埋-交联酶聚集体来进行磷脂酶A₁固定化的方法。用包埋-交联酶聚集体固定化磷脂酶A₁的方法通过以下步骤实现：一、磷脂酶A₁的固定化。二、酶活力的测定。三、固定化条件的优化。四、固定化酶酶学性质的讨论。五、通过固定化酶膜的SEM图像进一步解释包埋-交联磷脂酶A₁聚集体的优势。 

利用包埋-交联酶聚集体来进行磷脂酶A₁的固定化中，包埋-交联酶聚集体 具有化学稳定性好、机械性能优异等优点，根据这些优点来固定磷脂酶，提高了酶在反应体系中的活性和稳定性，调节和控制酶的活性与选择性，从而有利于酶的回收和保持较高的酶活回收率，最终得到的固定化酶活回收率为80.2％，重复使用7次相对酶活力保留在65％以上。 

具体实施方式

以下通过具体实施例来进一步描述本发明，但这些实施例仅是例证性的，并不对本发明的保护范围构成任何影响，本领域技术人员应该理解的是，根据本发明的精神所做的任何修改和替换均落入本发明的保护范围内。