[发明专利]西南银莲花总皂苷的制备方法及其在制备药物中的用途

说明书

技术领域

本发明属于医药、兽药技术领域，涉及一种西南银莲花总皂苷制备方法及其抗肿瘤的用途，如用于肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、白血病、淋巴癌等。 

背景技术

西南银莲花(Anemone davidii Franch)，又名铜钱草(湖北)、铜骨七(四川)和钻骨风(贵州)，来源于毛茛科银莲花属西南银莲花的干燥根状茎，生长于海拔950～3500m的山地中，分布于西南及湖北西部和湖南西北部。具有活血止痛、祛瘀消肿和补肾之功效，可用于治疗跌打损伤、风湿痛、劳伤、阳痿和腰痛。现代药理研究表明西南银莲花具有祛风湿、消痈肿、抗癌、抗肿瘤、抗菌等多种功效。该植物富含五环三萜皂苷，尤以齐墩果酸糖苷和常春藤配基糖苷为主，在体外可以明显抑制肺癌、结肠癌、卵巢癌、乳腺癌、肾癌、前列腺癌、黑素瘤以及白血病等癌细胞的生长。 

经过反复研究发现，西南银莲花的水提液、醇提液及其碱水解产物均具有抗肿瘤活性，尤其是碱水解产物，活性更强，经过进一步成分分析研究，发现其为皂苷类成分。 

发明内容

本发明利用现代分离技术对西南银莲花进行系统的化学成分分离，从中分离得到一种以3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷为主的西南银莲花总皂苷，通过体外抗肿瘤活性筛选研究，发现该总皂苷部位具有显著的抗肿瘤作用，而且其碱水解产物的活性明显强于水解前，成分分析发现，碱水解后产物中总皂苷含量较水解前大大提高。西南银莲花药材资源丰富，水解产物活性明确，制备工艺简单易行，适合工业化大量生产，可作为制备抗肿瘤药物，具有广阔的市场前景和开发价值。 

本发明的技术方案如下： 

1、西南银莲花总皂苷在制备抗肿瘤药物中的应用。 

2、西南银莲花总皂苷在制备抗肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、白血病、淋巴癌药物中的应用。 

4、西南银莲花总皂苷制备方法，包括以下步骤： 

第一步，将西南银莲花药材粉碎成粗粉，用水或0.1-95％乙醇浸泡0.5-2h，6-12倍量加热 回流提取2-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL，无醇味，0-4℃冷藏过夜，析胶，滤过，即得西南银莲花提取物。 

第二步，西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13，加热沸腾4-10小时，每30-60分钟测PH，保持在PH10-13，放冷，加盐酸溶液，调PH3-7，离心，去沉淀，即得西南银莲花提取物水解液。 

第三步，西南银莲花提取物水解液，经过D101或AB-8或ADS-17大孔树脂或小孔树脂吸附，依次用水、30-40％乙醇、50-80％乙醇、95％乙醇洗脱，收集50-80％乙醇洗脱部分，即得西南银莲花总皂苷。经抗肿瘤药理实验，证明该西南银莲花总皂苷为西南银莲花抗肿瘤有效部位。 

经成分分析，发现西南银莲花总皂苷中主要含有3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷、3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷、3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷、3-O-β-D-吡喃木糖基(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)[-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷、3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷等皂苷类成分。 

具体实施例：

以3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷为主的西南银莲花总皂苷制备方法为： 

实施案例1 

第一步，将西南银莲花药材粉碎成粗粉，用水浸泡0.5-2h，6-12倍量加热回流提取2-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液。上述滤液于50-70℃减压浓缩至0.5-1.0g生药材/mL，0-4℃冷藏过夜，析胶，滤过，即得西南银莲花提取物。 

第二步，西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13，加热沸腾4-10小时，每30-60分钟测PH，保持在PH10-13，放冷，加盐酸溶液，调PH 3-7，离心，去沉淀，即得西南银莲花提取物水解液。