[发明专利]金银花组培繁殖方法

权利要求书

1.金银花组培繁殖方法，其特征在于以带腋芽的金银花枝条为材料，进行金银花腋条组织培养繁殖，其步骤如下：

引种和诱导：从室外选取健壮、无病虫害带腋芽或顶芽的金银花嫩茎段，截成10-13cm的小段，剪去叶，留叶柄基部，用洗衣粉溶解于水清洗3-5分钟，再放到浓度为0.1%的升汞液中处理15-17分钟，然后用无菌水清洗4-5次，彻底除去升汞；接着取出外植体，用无菌滤纸吸干多余水分；

⑵分化培养：接种在分化培养基上，培养温度25-28℃，湿度50%，光照强度1500-3000Lx，光照时间为每天10-12小时；

⑶增殖培养：腋芽长出2-3cm时，进行分段处理，剪切成2.0-2.5cm长的茎段，将茎段转接至丛生芽增殖培养基上，培养温度25-28℃，湿度50%，光照强度1500-3000Lx，光照时间为每天10-12小时；

⑷生根培养：选取生长健壮高达2.5cm的无根小苗，切成单株后接种到生根培养基上，在温度23-25℃、湿度50%，光照强度1500-3000Lx，光照时间为每天10-12小时的环境下培养20天。

2.根据权利要求1所述的金银花组培繁殖方法，其特征在于分化培养基为MB +BA1.0-2.0mg/L+NAA0.3-0.5mg/L+30g/L蔗糖+6g/L琼脂，pH值为5.8。

3.根据权利要求1所述的金银花组培繁殖方法，其特征在于丛生芽增殖培养基为MB50ml+微量元素3.3ml+铁盐5ml+有机物5ml+6-BA0.4ml+IBA0.1ml+白糖30g+卡拉胶6g，pH值为5.8。

4.根据权利要求1所述的金银花组培繁殖方法，其特征在于生根培养基为：MB25ml+有机物、铁盐、微量元素各5ml+IBA3ml+糖20g+卡拉胶6g+AC0.5g，pH值为5.8。

5.根据权利要求2-4所述的金银花组培繁殖方法，其特征在于MB母液培养基由大量元素、铁盐、微量元素、有机物和激素组成，其具体配制成分和重量比为：

大量元素：硝酸钾1.5g、二水氯化钙0.3g、硝酸镁0.22g、磷酸二氢钾0.17g、硝酸铵0.15g、硫酸铵0.2g、磷酸二氢钠0.04g；

⑵铁盐：EDTA0.0373g、硫酸亚铁0.0278g；

⑶微量元素：碘化钾0.00083g、七水硫酸锌0.0086g/L、硼酸0.0062g、一水硫酸锰0.0223g、二水钼酸钠0.00025g、无水硫酸铜0.000025g、氯化钴0.000025g；

⑷有机物：甘氨酸0.002g、烟酸0.0005g、盐酸吡哆辛0.0005g、盐酸硫胺0.0004g、肌醇0.05g；

激素(单独配制)：6-BA1g/L、IBA1g/L、NAA1g/L。

6.根据权利要求2-5所述的金银花组培繁殖方法，其特征在于各培养基需要灭菌，将配制好的培养基装进灭菌器里，调节温度达到121℃时,记时灭菌21分钟，灭菌完后，迅速储存到无菌室。

7.根据权利要求1所述的金银花组培繁殖方法，其特征在于步骤2中，分化培养时每管接种1芽。

8.根据权利要求1所述的金银花组培繁殖方法，其特征在于步骤3中，增殖培养时每瓶接种3-5芽。