[发明专利]包封儿茶素的脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及化学领域的儿茶素和磷脂类，具体地是包封儿茶素的脂质体及其制备方法。

背景技术

脂质体是由磷脂、胆固醇等脂质成分组成的一种多层闭合囊泡结构，可将脂质体分为单室脂质体和多室脂质体两大类。由天然成分组成的脂质体是双分子层结构，类似于生物细胞膜，所以又称为人工生物膜。脂质体中磷脂成分是双亲性分子，既能与水溶性物质结合又能与脂溶性物质结合，水溶性物质包封于囊泡亲水基团夹层中，位于脂质体囊泡中央，而脂溶性物质包封于囊泡的双分子膜中。

构成脂质体双分子层的物质主要有磷脂(天然磷脂、人工合成磷脂)和胆固醇等。磷脂是含有磷脂根的类脂化合物，由卵磷脂，肌醇磷脂，脑磷脂等组成，它普遍存在于动植物细胞的原生质和生物膜中，是构成细胞膜的主要成分之一。其中磷脂酰胆碱(PC)是构成细胞膜中磷脂的主要成份之一，天然来源的PC是由不同长度、饱和度的脂肪链组成的一种混合物，而动物性PC的脂肪链大部分是饱和的，植物性PC含有大量高度不饱和性的脂肪链，虽然饱和脂肪链能增强其脂质体膜的稳定性和非渗透性，但不能降低甚至阻止与膜有关的生化反应。而天然来源PC-大豆卵磷脂富含有大量不饱和脂肪酸，能调整细胞中磷脂与胆固醇比例，增加细胞膜中磷脂的不饱和度、改善生物膜的功能。同时，选择大豆卵磷脂作为制备脂质体的膜材，其具有良好的生物相容性和流动性，而且有利于引发细胞间的生化反应。因此大豆卵磷脂作为制备脂质体的膜材已成为趋势。

儿茶素是茶叶中的提取物，它为还原性多元酚类物质，是茶叶的主要成分。儿茶素能对脂质的吸收产生干扰使得血浆中的三甘油酸酯降低，加速胆固醇的吸收，起去脂减肥，防止动脉粥样硬化等预防心血管疾病的作用，还具有抗氧化，抗衰老功能。儿茶素分子结构中酚羟基具有提供氢体的活性，能与脂肪酸氧化产生的游离基结合，具有抗氧化保鲜的作用。因儿茶素具有较强的抗氧化性，在潮湿、阳光、高温等条件下极易发生氧化、聚合、缩合等反应，在非保护状态下生物利用率不高，针对以上儿茶素在实际利用当中出现的问题，人们希望制备儿茶素脂质体对儿茶素进行包埋，提高它的抗氧化能力，从而解决它的生物利用度低等问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种包封儿茶素的脂质体的制备方法，本发明所得的包封儿茶素的脂质体能提高儿茶素的抗氧化能力，从而提高了儿茶素生物利用度。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种包封儿茶素的脂质体的制备方法，依次包括以下步骤：

1)、取大豆卵磷脂和胆固醇按照1.5～6∶1的质量比混合后溶解于溶剂I中，或者将大豆卵磷脂溶解于溶剂I中；于30～40℃的水浴中减压蒸发10～30分钟，从而形成一层脂质薄膜；所述大豆卵磷脂与溶剂I的质量/体积比为2～8毫克/毫升；

2)、向脂质薄膜中加入溶剂II从而溶解脂质薄膜，再加入含儿茶素的磷酸盐缓冲溶液，混合均匀后形成稳定的单相体系；

所述含儿茶素的磷酸盐缓冲溶液与步骤1)中的大豆卵磷脂的液料比为：1ml/7～25mg；

所述含儿茶素的磷酸盐缓冲溶液中儿茶素与磷酸盐缓冲溶液的质量/体积比为10～16毫克/毫升；

3)、将所述单相体系(于室温下，室温一般指10～30℃)减压后蒸发30～50分钟，从而形成水性悬浊液，得包封儿茶素的脂质体。

作为本发明的包封儿茶素的脂质体的制备方法的改进：步骤1)中的溶剂I为氯仿、三氯甲烷、乙醇、二氯甲烷、丙二醇或甲醇。

作为本发明的包封儿茶素的脂质体的制备方法的进一步改进：步骤2)中的溶剂II为乙醚或二异丙醚。

作为本发明的包封儿茶素的脂质体的制备方法的进一步改进：步骤2)中的混合为：在水浴超声仪上超声直至混合物形成稳定的单相体系；例如在30～45kHz的超声波中，在水浴温度为8～12℃下超声10～30min。

作为本发明的包封儿茶素的脂质体的制备方法的进一步改进：步骤1)中在0.02～0.1MPa的真空度下进行减压蒸发。

作为本发明的包封儿茶素的脂质体的制备方法的进一步改进：步骤3)于0.02～0.1MPa的真空度下进行减压蒸发。

在本发明中，步骤1)中的大豆卵磷脂与步骤2)中的溶剂II的质量/体积比为2～8毫克/毫升。步骤2)中：含儿茶素的磷酸盐缓冲溶液是按照10～16mg儿茶素溶解在1ml的PBS磷酸盐缓冲溶液(pH为6.81)中的比例制备而得的。