[发明专利]一种提取纯化6,8-二异戊烯基金雀异黄素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然植物提取技术领域，涉及一种提取纯化6,8-二异戊烯基金雀异黄素的方法。

背景技术

6,8-二异戊烯基金雀异黄素（6,8-Diprenylgenistein）分子式为C₂₅H₂₆O₅，分子量为406.48，CAS登录号为：51225-28-6，mp.140-142℃，为无色针晶，是一种异黄酮类化合物。广泛分布与豆科植物中，如攀登鱼藤Derris scandens Benth.茎、塞内加尔河刺桐Erythrina senegalensis Harms茎皮、刺桐Erythrina variegate var.orientalis(L.)Merr.根、山豆根Euchresta horsfieldii(Leschen.)Benn.根和茎、厚果鸡血藤Millettia pachycarpa Benth.地上部分和种子以及胀果甘草根中。药理研究表明，6,8-二异戊烯基金雀异黄素具有多种活性，浓度为10μM时，对牛的晶状体醛糖还原酶的抑制率为60%，对cAMP磷酸二酯酶的IC₅₀为203μM，另外，体外6.25μg/mL时，对金黄色葡萄球菌和包皮垢分枝杆菌具有抑制作用。

对于6,8-二异戊烯基金雀异黄素的研究尚处于起步阶段，尚未见其提取工艺方面的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取纯化6,8-二异戊烯基金雀异黄素的方法。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案实现的：

一种提取纯化6,8-二异戊烯基金雀异黄素的方法，其特征在于包括以下步骤：将富含6,8-二异戊烯基金雀异黄素的药材晒干、粉碎，用石油醚回流脱脂，然后用60-80%乙醇溶液冷浸2-3次，每次1-3天，过滤，合并滤液，膜浓缩，将浓缩液加入无机盐溶液和聚乙二醇，搅拌使其充分混合萃取，静置，取上相用超滤膜将含有6,8-二异戊烯基金雀异黄素部分和聚乙二醇分离，将含有6,8-二异戊烯基金雀异黄素部分上硅胶常压柱层析，石油醚-丙酮洗脱，二氯甲烷-丙酮重结晶即得到6,8-二异戊烯基金雀异黄素单体成分。

所述无机盐溶液为硫酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾中的一种或几种结合。

所述膜浓缩所用超滤膜截留分子量为2000-6000，纳滤膜的截留分子量为200-300。

所述聚乙二醇的相对分子量是4000或6000，双水相体系中聚乙二醇的质量浓度为13-28%，无机盐的质量浓度为10-13%，萃取温度为22-37℃，所述的静置时间为12-18小时。

所述膜分离含有6,8-二异戊烯基金雀异黄素部分和聚乙二醇所用超滤膜的截留分子量为2000-3000。

本发明采用双水相萃取，选择性地富集黄酮类成分，工艺流程短、简单易行，可放大连续操作；采用膜分离浓缩可显著降低能耗。

具体实施方式

实施例1：

将厚果鸡血藤地上部分晒干、粉碎成粗粉，称取5000g先用6倍量（30L）石油醚回流脱脂2次，每次1h，再用8倍量75%乙醇冷浸2次，每次3天，过滤，合并滤液，滤液加入截留分子量4000的中空纤维超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量300的中空纤维纳滤膜浓缩，浓缩液依次加入聚乙二醇和硫酸铵，使所形成的双水相萃取体系中聚乙二醇的质量浓度为18%，硫酸铵的质量浓度为12%，26℃条件下搅拌萃取1h，静置12h形成两相，取上相，采用截留分子量3000的超滤膜将含有6,8-二异戊烯基金雀异黄素部分和聚乙二醇分离，收集透过液含有6,8-二异戊烯基金雀异黄素部分，进行常压硅胶（200-300目）柱层析，石油醚-丙酮（9:1-6:4）梯度洗脱，TLC检测合并含有6,8-二异戊烯基金雀异黄素的流分，减压浓缩干燥，二氯甲烷-丙酮重结晶即得到1.36g6,8-二异戊烯基金雀异黄素晶体，含量为97.8%。

实施例2：