[发明专利]土贝母总皂苷的提取富集方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种皂苷的提取富集方法，特别涉及一种土贝母总皂苷的提取富集方法。

背景技术

土贝母Rhizoma Bolbostematis为葫芦科植物土贝母Bolbostemma paniculatum(Maxim.)Franquet的干燥块茎，味苦，性微寒，归肺、脾经，具有散结、消肿、解毒之功效，中医用于治疗乳痈、瘰疬、乳腺炎、颈淋巴结结核、慢性淋巴炎、肥厚性鼻炎等。土贝母中含有皂苷、生物碱、甾醇等。现代药理学研究表明，土贝母皂苷成分具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎等药理作用，目前已分离出的皂苷成分有土贝母苷I、土贝母苷II、土贝母苷III、土贝母苷VI、土贝母苷IV、7β，18，20，26-四羟基-20(S)-24E-达玛甾烯-3-0-α-L(3’-乙酰基)吡喃阿拉伯糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、7β，18，20，26-四羟基-20(S)-24E-达玛甾烯-3-0-α-L(4’-乙酰基)吡喃阿拉伯糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、7β，18，20，26-四羟基-20(S)-24E-达玛甾烯-3-0-α-L吡喃阿拉伯糖-(1→2)-β-D-(6’-乙酰基)吡喃葡萄糖苷等。

目前，对土贝母总皂苷的提取富集方法的研究文献研究不多。

中国专利93110381.9记载了一种土贝母总皂苷的制备方法，包括：将土贝母药材粉碎至5～20目，用60～80％乙醇或甲醇于≤80℃浸提2～4次，蒸去溶剂，余液浓缩至浸膏，用2～4倍量水稀释后，用水饱和的C₄～C₅脂肪醇萃取2～4次，萃取液减压蒸去有机溶剂，真空干燥得土贝母总皂苷。

朱海鸥等(中成药，2011年1月，第33卷第1期，第49～53页，“土贝母总皂苷的提取及大孔树脂纯化工艺研究”)公开了一种土贝母的总皂苷的提取纯化工艺，包括：将土贝母药材用60％的乙醇20倍体积(8∶6∶6)提取3次，每次1.5h，药液浓缩后以0.2g·mL^-1的浓度上样于处理好的NKA-9树脂(药材量与树脂量之比为0.6g∶1mL)，以7BV水洗脱除杂后，再用3BV的95％乙醇洗脱即得到土贝母总皂苷，以高氯酸-香草醛溶液比色法测定其平均总皂苷含量为90.66％，平均收率为3.34％。

马挺军等(中国中药杂志，2005年5月，第30卷第10期，第744～746页，“大孔吸附树脂分离富集土贝母总皂苷的研究”)公开了一种土贝母总皂苷的提取分离富集方法，包括：称取粉碎的土贝母药材，加入70％乙醇，加热回流提取3次，每次2h，减压蒸干得浸膏，将浸膏用适量水溶解后制成上样液，上NKA大孔吸附树脂柱，80％乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后得总皂苷。

然而用上述文献方法提取土贝母总皂苷时，有的使用有机溶剂，易造成溶剂残留，影响药品的安全性；有的纯度虽超过50％，但总皂苷的转移率低，损失严重，造成生产成本提高和资源浪费。

因此，本发明要解决的技术问题在于，提供一种土贝母总皂苷的提取富集方法，该方法在保证提取物中总皂苷含量达到《药品注册管理办法》规定的有效部位的含量应大于50％的同时，还能够提高土贝母总皂苷的转移率。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种土贝母总皂苷的提取富集方法，该方法在保证提取物中总皂苷含量达到《药品注册管理办法》规定的有效部位的含量应大于50％的同时，还能够提高土贝母总皂苷的转移率。

为实现上述目的，本发明采取了如下技术方案：

一种土贝母总皂苷的提取富集方法，包括：第一步骤，将土贝母粉碎，以体积分数为60～80％的乙醇溶液作为提取溶剂提取，收集提取液后去除提取液中的溶剂，并使所得提取物干燥，得总皂苷粗提物；第二步骤，将所述总皂苷粗提物溶解于水并过滤去除不溶物质，将滤液作为上样液，将所述上样液上样于HPD750型大孔树脂柱后，水洗至多糖检测反应为阴性，继续以体积分数为90～95％的乙醇溶液作为洗脱溶剂，洗脱至洗脱液皂苷检测反应呈阴性，收集乙醇洗脱液，去除其中的溶剂，并使所得物干燥，得总皂苷提取物。

进一步地，在本发明的土贝母总皂苷的提取富集方法中，在第一步骤中，以体积分数为70％的乙醇溶液作为所述提取溶剂。

进一步地，在本发明的土贝母总皂苷的提取富集方法中，在第一步骤中，所述提取溶剂的用量为每1g土贝母使用4～6mL的提取溶剂，用提取溶剂提取的次数为不低于2次，提取时间为每次2～3小时。