[发明专利]防治温室大棚黄瓜霜霉病的生防菌株BS1及其应用

权利要求书

1.一种防治温室大棚黄瓜霜霉病的生防菌株BS1，为蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)，于2011年4月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCCNO.4736。

2.权利要求1所述的保藏号为CGMCC NO.4736的蜡质芽孢杆菌BS1在制备防治温室大棚黄瓜霜霉病的药物中的应用。

3.一种防治温室大棚黄瓜霜霉病的生防菌剂，其特征在于以权利要求1所述的保藏号为CGMCCNO.4736的蜡质芽孢杆菌BS1为有效成分，其中蜡质芽孢杆菌BS1的活菌浓度为1×10⁹～10¹⁰CFU/ml。

4.权利要求3所述的防治温室大棚黄瓜霜霉病的生防菌剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤：

1)BS1种子菌液的培养：将权利要求1所述的菌株BS1接种到LB培养液中32℃200rpm振荡培养18-24h，12～16小时后定期取样测600nm处的OD值，测定过程中以未接菌的培养液来调零，直到种子菌液OD值均在0.5～0.8之间时结束培养，获得种子菌液；

2)菌剂制备：将种子菌液以1∶100体积比加入装有发酵培养液的发酵罐中，30℃250rpm振荡培养20～24小时，发酵液pH值维持在7.0，溶氧量20％，通气量5～7m³/小时，罐压0.05～0.1KPa，然后4000rpm离心10min，每1000ml培养液获得12～15g湿菌，取湿菌与菌体保藏液按1g∶40ml配成以菌株BS1为有效成分的生防菌剂，活菌浓度为1×10⁹～10¹⁰CFU/ml。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的发酵培养液配方为：麦芽糖1.2g/L，玉米粉2.4g/L，黄豆粉2.4g/L，蛋白胨3.2g/L，二水氯化钙0.12g/L，一水硫酸锰0.12g/L，磷酸氢二钾0.18g/L，调节pH值为7.2～7.4；

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的菌体保藏液的制备方法为：pH6.8，0.03mol/L的磷酸盐缓冲液中加入Tween20至Tween20在缓冲液中的终浓度为0.02mol/L即得菌体保藏液。