[发明专利]应用乳腺上皮细胞制备乳腺特异性表达转基因动物的方法

权利要求书

1.应用乳腺上皮细胞制备乳腺特异性表达转基因动物的方法，包括以下步骤：

（1）将外源基因通过表达载体转染体外培养的乳腺上皮细胞，并应用催乳素3-8μM诱导表达；

（2）筛选获得高效表达乳腺上皮细胞系；

（3）高效表达细胞系进行一步或二步细胞核移植，获得乳腺特异性表达个体。

2.根据权利要求1所述的应用乳腺上皮细胞制备乳腺特异性表达转基因动物的方法，其特征在于： 步骤（2）中，取每株细胞中的1/2-1/4的细胞传代培养至80%丰度,在培养液中添加催乳素3-8μM诱导外源基因的表达。

3.根据权利要求2所述应用乳腺上皮细胞制备乳腺特异性表达转基因动物的方法，其特征在于：分别在24-96小时取细胞上清液进行表达产物检测。

4.根据权利要求1所述应用乳腺上皮细胞制备乳腺特异性表达转基因动物的方法，其特征在于：细胞核移植所用的供核细胞是经步骤（2）和（3）筛选的特殊细胞系。

5.根据权利要求4所述应用乳腺上皮细胞制备乳腺特异性表达转基因动物的方法，其特征还在于：乳腺上皮细胞体细胞核移植后20-50天的胎儿用作供核细胞，进行二步克隆。