[发明专利]一种从固态发酵纳豆中分离溶栓物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及溶栓物质的提取，具体的说是一种从固态发酵纳豆中分离溶栓物质的方法。

背景技术

在现代社会生活中，血栓性疾病是一种常见病，常表现为心肌梗死、缺血性脑梗死、静脉血栓栓塞。据世界卫生组织公布的数据显示，心脑血管疾病已经成为危害人类健康的第一杀手。目前，我国约有1.1亿人患有高血压、动脉硬化等心脑血管疾病，其发病具有高死亡率、高复发率、高致残率的特点。因此，开发具有预防和治疗血栓性疾病的功能食品，具有广阔的市场前景与深远的社会意义。

纳豆是由黄豆经纳豆菌发酵而成的一种健康食品，其中所含丰富的纳豆激酶，被公认为是一种安全的食用血栓预防剂。它不同于目前使用的大多数以激活纤维蛋白溶酶为基础的溶栓药物，纳豆激酶可直接溶解血液中的交联形式的纤维蛋白。长期食用纳豆对预防心脑血管疾病具有积极作用。此外，纳豆中还富含优质小分子蛋白质(多肽)、超氧化物歧化酶(SOD)、异黄酮等生理活性物质及对人体有益的纳豆菌，因而被誉为″超级健康食品″、“世界第一健康美食”等。特别是每天坚持食用100克左右的纳豆对人体免疫功能、调节血脂、预防心血管疾病、增加骨密度等都能起到很好的保健作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从固态发酵纳豆中分离溶栓物质的方法。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种从固态发酵纳豆中分离溶栓物质的方法：将原料纳豆用无菌水于在4℃-10℃下浸提5-8小时，而后过滤收集浸提液，将4℃-10℃的无水乙醇加入到浸提液中静置沉淀3-5小时后离心，沉淀即为得到的纳豆溶栓物质。

所述浸提时纳豆与无菌水的质量比为1∶1-3。所述无水乙醇加入到浸提液中至乙醇终浓度体积比为70-80％，静置沉淀3-5小时。所述无水乙醇加入到浸提液中静置沉淀后在4-10℃，以6000-10000转/分钟，离心8-10min，将所得沉淀冻干，即为纳豆溶栓物质。

本发明所具有的优点：

1.依照本发明的方法提取的溶栓物质提取纯度高，其溶栓物质是固态发酵纳豆溶栓活性的30倍；

2.本发明提取方法成本低所用试剂为可回收乙醇，比传统盐析方法节约能源；

3.本发明提取方法中沉淀分离容易，加入冰乙醇后抽提物以胶状聚合物的形式析出，工业操作简单。

附图说明

图1为本发明实施例提供的标准曲线图，其为以尿激酶活力(UI)为横坐标，溶纤圈面积的对数值为纵坐标，制作标准曲线。

图2为本发明实施例提供的所得溶栓物质活性示意图。

具体实施方式

实施例1

纳豆为原料(购自沈阳科健生物技术有限公司)，以无菌水1∶1质量6℃浸提6小时，过滤浸提物得浸提液。将4℃的无水乙醇加入到浸提液中至乙醇体积浓度为70％。静置沉淀3小时后在4℃，以6000转/分钟，离心10min，将所得沉淀在真空条件下冻干(真空泵条件-50到-70℃，16-24h)，即为纳豆溶栓物质。

实施例2

在纳豆中加入无菌水1∶1质量6℃浸提8小时，过滤浸提物得浸提液。将6℃的无水乙醇加入到浸提液中至乙醇体积浓度为80％。静置沉淀4小时后在10℃，以10000转/分钟，离心8min，将所得沉淀在真空条件下冻干(真空泵条件-50到-70℃，16-24h)，即为纳豆溶栓物质。

实施例3

在纳豆中加入无菌水2∶1质量10℃浸提5小时，过滤浸提物得浸提液。将6℃的无水乙醇加入到浸提液中至乙醇体积浓度为80％。静置沉淀5小时后在8℃，以8000转/分钟，离心9min，将所得沉淀在真空条件下冻干(真空泵条件-50到-70℃，16-24h)，即为纳豆溶栓物质。

实施例4

在纳豆中加入无菌水2∶1质量10℃浸提8小时，过滤浸提物得浸提液。将4℃的无水乙醇加入到浸提液中至乙醇体积浓度为70％。静置沉淀5小时后在9℃，以9000转/分钟，离心8min，将所得沉淀在真空条件下冻干(真空泵条件-50到-70℃，16-24h)，即为纳豆溶栓物质。

实施例5

在纳豆中加入无菌水3∶1质量4℃浸提5小时，过滤浸提物得浸提液。将10℃的无水乙醇加入到浸提液中至乙醇体积浓度为80％。静置沉淀4小时后在6℃，以7000转/分钟，离心9min，将所得沉淀在真空条件下冻干(真空泵条件-50到-70℃，16-24h)，即为纳豆溶栓物质。

实施例6