[发明专利]一种快速定量测定尿碘的方法

说明书

技术领域

本发明属于检测试剂类，具体地属于测定尿中碘含量的检测方法。 

背景技术

碘缺乏与碘过量作为严重危害人类健康的疾病已引起人们的普遍关注，因而准确评价人群碘营养状态尤为重要。人体摄入的碘除了被甲状腺摄取的部分(约50～75μg/L)，其余皆被排出体外，其中80％～85％经尿液排出，因此普遍认为尿碘水平是评价及监测人群碘营养状况的最适指标。 

目前我国尿碘测定的卫生行业标准方法是过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度法，该方法采用在试管中对样品逐一消化，试剂用量较多，操作过程繁琐，并且对于反应时间要求严格，因此无法实现批量样品的快速测定。 

国内专利CN 1170147C公开了“尿碘定量检测试剂盒及尿碘检测方法”，碘标准溶液、尿样经消解后，先加入解析剂或中和剂，再加还原剂进行还原。但是不够简便和灵敏。 

标准方法因其较高的灵敏度，在尿碘测定中已被广泛用采用，但在该方法中，样品的消化和光催化反应过程需要在试管中逐一进行，不仅导致无法批量测定样品，而且试剂用量大，特别是亚砷酸的较大用量，造成了一定的环境污染。 

发明内容

本发明的目的是根据上述现状况，旨在提供一种快速、准确定量检测尿中碘含量的方法。 

本发明定量检测尿中碘含量的方法，包括步骤： 

1、采用12道移液排枪吸取同时吸取不同浓度的7份碘标准系列溶液50μL加至96微孔板的第一排微孔中，然后采用排枪同时吸取12份尿样50μL加入微孔板的第二排微孔中，同样吸取另四批尿样(每批12份)50μL分别置于微孔板的第三、四、五、六排微孔中，然后用排枪于加样微孔中加入100μL的过硫酸铵。 

2、将微孔板密封后置于100℃的恒温干燥箱中消化60min。 

3、消化后将密封盒的底部用自来水冷却至室温，防止微孔板凹槽上部的水蒸气凝结，同时终止消化。 

4、将冷却后的密封板打开，加入100μL的亚砷酸溶液混匀，然后用排枪每排间隔30s，快速加入50μL的硫酸铈铵溶液。 

5、反应混合物在室温下(27℃)反应10分钟后，采用酶标仪每排间隔30s读出各孔中溶液在420nm处的吸光度数值。 

本发明的优点及效果： 

1、本发明将96微孔板作为消化容器和催化反应容器，同时利用12道移液排枪进行试剂的批次移加，酶标仪进行多个样品吸光度的同时测定，大幅度减少了测定试剂用量、缩短了测定时间、简化了操作程序，对提高尿碘检测的效率、降低检测成本。 

2、本发明采用耐热性和化学惰性良好的聚丙烯微孔板作为消化容器和催化反应容器，利用自制的密封板，防止微孔板中水蒸气漏出和样品的交叉污染；同时采用酶标仪同时测定多份样品的吸光度，实现了微量样本的批量测定。 

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知 的常规手段。 

实施例1标准曲线及样品测试 

本发明定量检测尿中碘含量的方法，包括步骤： 

1、采用12道移液排枪吸取同时吸取不同浓度的7份碘标准系列溶液50μL加至96微孔板的第一排微孔中，然后采用排枪同时吸取12份尿样50μL加入微孔板的第二排微孔中，同样吸取另四批尿样(每批12份)50μL分别置于微孔板的第三、四、五、六排微孔中，然后用排枪于加样微孔中加入100μL的过硫酸铵。 

2、将微孔板密封后置于100℃的恒温干燥箱中消化60min。 

3、消化后将密封盒的底部用自来水冷却至室温，防止微孔板凹槽上部的水蒸气凝结，同时终止消化。 

4、将冷却后的密封板打开，加入100μL的亚砷酸溶液混匀，然后用排枪每排间隔30s，快速加入50μL的硫酸铈铵溶液。 

5、反应混合物在室温下(27℃)反应10分钟后，采用酶标仪每排间隔30s读出各孔中溶液在420nm处的吸光度数值。 

同批次进行标准曲线绘制和60份样品测试。结果表明在0-300μg//L碘浓度范围内，标准曲线方程为：C＝17.68-367.4lgA，R＝0.9985。 

60例尿碘含量测定平均值为132μg/L。