[发明专利]一种提取大豆种子DNA的方法无效
| 申请号： | 201110320948.1 | 申请日： | 2011-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN102344922A | 公开（公告）日： | 2012-02-08 |
| 发明（设计）人： | 王存芳;刘天明 | 申请（专利权）人： | 山东轻工业学院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 杨琪 |
| 地址： | 250353 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提取 大豆 种子 dna 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种提取大豆种子DNA的方法，其特征在于，步骤如下：
(1)取适量大豆种子，粉碎，待用；
(2)取0.1g上述粉末，置于1.5ml离心管中，加入100ul 20％的SDS溶液、500ul CTAB提取缓冲液和4ul蛋白酶K，充分混匀后，放入60～65℃恒温水浴锅中消化60min，期间每10min颠倒混匀一次；
(3)加入36ul 5mol/L的KAC，混匀，冰浴30min，10000～12000r/min离心10min；
(4)取上述离心后的上清液，置于另一离心管中，加入等体积的氯仿/异戊醇，轻柔颠倒混匀10min，10000～12000r/min离心10min；
(5)取上述离心后的上清液，沿管壁缓慢旋转加入等体积-20℃预冷的异丙醇，室温下沉淀，10000～12000r/min离心3min；
(6)弃去上述离心后的上清液，用500ul 70％乙醇洗涤沉淀3次，即得大豆种子DNA。
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