[发明专利]一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法

权利要求书

1.一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)外植体的处理：选取生长健康和无病虫害的苦荞叶，切去叶片部分，将叶柄用浓度为0.1％的升汞消毒2～6分钟，再用无菌水清洗3～4次；

(2)愈伤组织诱导：将消毒后的叶柄外植体上的水分吸干，再切成0.7cm～1.5cm的长度，然后接入愈伤组织诱导培养基MS+6-BA 0.1～2.0mg/L+2，4-D 1～6mg/L+IAA 0～1mg/L中进行培养；

(3)芽分化培养：选取质地较紧密、生长状况良好的愈伤组织，将其切成0.5～1.0cm²的块状后，接入芽分化培养基MS+6-BA 1.0～4.0mg/L+NAA0.1～1mg/L+KT 0～1.5mg/L中进行培养；

(4)生根培养：当不定芽长至2.0～4.0cm时，将其切下转接到生根培养基MS+IBA 0～2.0mg/L上进行生根培养；

(5)炼苗和移栽：当组培苗不定根生长健壮时，打开瓶盖，先在室内炼苗2～4天，再将组培苗从培养瓶中取出，洗去不定根上的培养基，将其移栽至松软的土壤中生长；

上述所有培养基的pH值为5.5～6.7、蔗糖15～50g·L^-1、琼脂6.0～7.0g·L^-1；

上述光照培养条件均为每天光照8～16小时、光照强度为1500～2500lx、培养温度20～27℃。

2.根据权利要求1所述的一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法，其特征在于：步骤(1)中苦荞叶应在晴天选取且叶龄为3～40天。

3.根据权利要求1所述的一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法，其特征在于：步骤(2)中消毒后的叶柄外植体在切成0.7cm～1.5cm的长度前，应先切去叶柄两端少量的游离末端，使切口保持新鲜。

4.根据权利要求1所述的一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法，其特征在于：步骤(2)中叶柄外植体接入培养基的方式为正接、反接或平放。

5.根据权利要求1所述的一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法，其特征在于：步骤(5)中将组培苗移栽至松软的土壤中生长时应适当遮光，温度保持在20～27℃，相对湿度在70～80％。