[发明专利]一种金银花药材及其制剂中绿原酸和三种异绿原酸的定量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种金银花药材及其制剂中绿原酸和三种异绿原酸的定量测定方法。

背景技术

金银花为忍冬科植物Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花。是一种常用中药，具清热解毒，疏散风热的功效。用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温病发热。制剂系指含蔗糖的和不含蔗糖的小儿咽扁颗粒，为小儿用药，是中国药典2010年版一部收载的品种，具清热利咽，解毒止痛的功效。用于小儿肺卫热盛所致的喉痹、乳蛾，症见咽喉肿痛、咳嗽痰盛、口舌糜烂；急性咽炎、急性扁桃腺炎见上述证候者。不含蔗糖的小儿咽扁颗粒处方及制法如下：

处方：金银花    218.8g    射干    125g    金果榄    156.2g

            桔梗      156.2g    玄参    156.2g  麦冬      156.2g

            人工牛黄  0.62g     冰片    0.32g

制法：以上八味，除人工牛黄、冰片外，其余金银花等6味加水煎煮二次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.32～1.35(50℃)，加入甜菊素约18g、适量糊精及人工牛黄，混匀，制成颗粒，干燥，加入冰片，混匀，制成1000g，即得。

含蔗糖的小儿咽扁颗粒处方及制法如下：

处方：金银花    109.4g    射干    62.5g    金果榄    78.1g

            桔梗      78.1g     玄参    78.1g    麦冬      78.1g

            人工牛黄  0.31g     冰片    0.16g

制法：以上八味，除人工牛黄、冰片外，其余金银花等6味加水煎煮二次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.32～1.35(50℃)，加入蔗糖700～800g、适量糊精及人工牛黄，混匀，制成颗粒，干燥，加入冰片，混匀，制成1000g。

文献报道，金银花的主要有效成分有绿原酸类，即绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸等；异绿原酸类，即异绿原酸A、B、C等；黄酮类，即木犀草苷、木犀草素等。在金银花药材中含量最高的是绿原酸，可高达5.19％；其次是异绿原酸A，可达2％；黄酮类的木犀草苷含量最低，药典规定不得少于0.05％。上述成分都具有较强的抗菌、消炎与解热镇痛作用。在中国药典2010年版一部金银花药材项下，收载了绿原酸和木犀草苷的含量测定，前者是采用等度洗脱，后者是采用梯度洗脱。本发明人员在探讨绿原酸、异绿原酸和木犀草苷的含量测定中，从测定图谱得知木犀草苷的含量远较绿原酸和异绿原酸A低得多，既便在木犀草苷最大波长348nm处(绿原酸的非最大波长)测定，木犀草苷的波峰面积也仅为绿原酸的1/63，异绿原酸A的1/42。由于金银花药材中木犀草苷的含量太低，投料到复方制剂中后，加上提取率以及其他药味的成分干扰，其波峰是不能检出的，所以在制剂中目前都是以单一的绿原酸为指标，进行定量测定的。查阅到一些金银花药材及其提取物的指纹图谱报道，但都是梯度洗脱方式，以绿原酸为参照物，计算多种峰的相对保留时间和相对峰面积比值的，无法得到定量数值和限度规定。还未查阅到以等度洗脱的方式，同时测定金银花药材及其制剂中绿原酸和三种异绿原酸含量报道的文献。绿原酸和异绿原酸类都是金银花的有效成分，其光谱扫描图基本相同(见图1、图2、图3、图4)，且异绿原酸A、B、C的含量之和约为绿原酸的70～110％，所以只测定绿原酸，无法正确评价药材与制剂的整体质量。但异绿原酸A、B、C的含量比例，在药材和制剂中差异较大，在药材中绿原酸A的含量最高，绿原酸C的含量极微；而在制剂中三者的含量比例相差不大，应是提取过程中由A转变而成。

在上述背景情况下，为简便、快捷、科学、规范、多指标控制药材与其制剂的质量，发明了金银花药材及其制剂中绿原酸和三种异绿原酸的定量测定方法。

发明内容

首次采用普通的等度洗脱，以体积比为15～14∶6.5～6∶78.5～80的乙腈-甲醇-0.1％磷酸为流动相，在326±2nm处，同时测定了金银花药材及其制剂中绿原酸和三种异绿原酸A、B、C的含量。方法简便、快捷，易于普及掌握；在三种不同的色谱柱上，四种成分的定量色谱图，各波峰分离良好，基线平稳，在20～30分钟内出峰完毕。