[发明专利]一种西藏琵蝎抗单纯疱疹病毒活性多肽及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及西藏琵蝎抗单纯疱疹病毒活性多肽。本发明还涉及了一种治疗治疗单纯疱疹、口唇疱疹、生殖器疱疹、带状疱疹外用凝胶。

背景技术

单纯疱疹病毒(HSV)是一种常见的人类传染病病毒，主要感染口、眼、唇的皮肤和粘膜、中枢神经系统、生殖器、内脏器官等，引起口唇疱疹、脑炎、角膜结膜炎、生殖器疱疹等疾病。疱疹的治疗手段多为外用药，内服药，或内服药与外用药结合，亦采用物理方法治疗，但总体上治疗效果不理想，用后不良反应较多。

目前疱疹主要采用抗病毒药物治疗。如阿昔洛韦(ACV)是一种开链嘌呤核苷，能抑制病毒脱氧核糖核酸合成，而对宿主细胞DNA的合成作用较少。被认为是目前最有效的抗HSV药物。病情严重者可静脉给药。能使病毒迅速减少，症状减轻，愈合时间缩短。外用3％-5％ACV软膏也能减轻症状和缩短病程。对复发次数较为频繁的患者，可预防性的服药。近年来新开发出无环鸟苷的类似物，如万乃洛韦(valaciclovir)、法昔洛韦(famicidovir)、潘昔洛韦(pencidovir)等，具有疗效确切、生物利用度高等优点。另外，三氮唑核苷是一种鸟嘌呤核苷的类似物，有抗DNA和RNA病毒的作用，口服能减轻疼痛和缩短病程。

但这些抗病毒药物的使用产生病毒的耐药性，当前许多治疗疱疹药物大部分疗效不佳是由于耐药病毒株感染所导致。阳离子防御肽是一类由宿主生成，并且在天然免疫中特异性发挥防御性作用的一类小肽。这一类小分子多肽通常由10-50个氨基酸构成，静电荷从+2到+9不等，在生物体抵御微生物的入侵中发挥重要的作用。根据结构的差别，阳离子防御肽可以分为如下几类：含有2-4个β片层的两亲性分子、两亲性α螺旋、卷曲结构、以及含有高级结构的分子。阳离子防御肽在体内对细菌、真菌、寄生虫、以及病毒的侵染均有有效的抵御作用。研究表明，蜂毒溶血肽Melitiin和天蚕素Cecropins在亚毒性浓度下通过阻遏基因表达来抑制HIV-1病毒的增殖，爪蟾抗病毒多肽Magainin-2对疱疹病毒HSV和HSV-2有一定的抑制效果，这些多肽都是α螺旋类阳离子防御肽。目前的研究表明，α螺旋类阳离子防御肽特异性作用于有包膜的RNA病毒及DNA病毒，其作用方式通常是作用于病毒进入的过程，或者是直接作用于病毒的包膜。例如，Dermaseptin就是通过作用于HIV的包膜而引起HIV的失活，从而达到抗病毒的作用。所以，阳离子防御肽不再是传统的疫苗防治，而是通过直接抑制病毒达到抗病毒的目的。蝎子中阳离子防御肽的研究也已经有多年的历史。其中除了从淋巴系统中发现的防御肽外，更多的是从蝎毒腺中分离到的防御肽，例如Hadrurin，Scorpine，Opistoporin，Parabutoporin，ISCT，Pandinin。

这些被称为多肽的生物活性物质，因为具有纯生物物质、稳定性强、杀病毒强、广谱、无抗药耐药性、无毒副作用和“三致”作用特点。AHSVP1是从西藏琵蝎获得的一个天然抗病毒分子，由于产生机制、抗病毒机制和作用方式与传统抗病毒药物不同，可很快杀灭病毒而自身不产生耐药性，且肽水解后的氨基酸有利于皮肤组织的生成。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供蝎源抗单纯疱疹病毒活性高的阳离子多肽及其治疗单纯疱疹、口唇疱疹、生殖器疱疹、带状疱疹的外用凝胶制剂。

为了实现上述目的，首先构建高质量西藏琵蝎毒腺组织cDNA文库，具体包括蝎毒腺总RNA的分离和mRNA纯化，cDNA的第一链和第二链合成，双链cDNA与pSPORT1载体的连接和转化，获得蝎毒腺组织cDNA文库。在构建文库的基础上，随机挑选2000克隆子进行测序，序列分析发现第1283克隆子为一个新的西藏琵蝎抗病毒多肽基因，命名为AHSVP1。

本发明公开了一种分离的西藏琵蝎多肽基因AHSVP1，其序列为SEQ IDNO：1所示的核苷酸序列：