[发明专利]HTNV-NP 特异性的CTL 表位肽及其应用

权利要求书

1.HTNV-NP特异性的CTL表位肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1～12所示。

2.如权利要求1所述的HTNV-NP特异性的CTL表位肽，其特征在于，SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12所示的表位肽与HLA-I类分子结合并递呈后，可诱导CD8+T细胞产生细胞免疫应答。

3.权利要求2所述的HTNV-NP特异性的CTL表位肽应用于CTL表位肽疫苗的制备，或应用于诱导产生CTL表位肽特异性的细胞毒性T细胞，或应用于制备CTL表位肽致敏的抗原提呈细胞。

4.一种HTNV-NP特异性的CTL表位肽致敏的抗原提呈细胞，其特征在于，是将CTL表位肽与包含其相匹配HLA-I类分子的抗原提呈细胞，在含20％体积分数FCS的RPMI 1640培养液中共同孵育，37℃过夜，洗涤去除游离的CTL表位肽，获得CTL表位肽致敏的抗原提呈细胞；

所述的CTL表位肽相与其相匹配HLA-I类分子分别为：

SEQ ID NO：1所示的CTL表位肽与HLA-A*02分子相匹配；

SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10所示的CTL表位肽均与HLA-B*35分子相匹配；

SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：12所示的CTL表位肽均与HLA-A*33分子相匹配；

SEQ ID NO：6所示的CTL表位肽与HLA-A*11分子相匹配；

SEQ ID NO：11所示的CTL表位肽与HLA-B*07分子相匹配。

5.如权利要求4所述的HTNV-NP特异性的CTL表位肽致敏的抗原提呈细胞，其特征在于，所述的抗原提呈细胞为用B95-8细胞系培养上清转化外周血单个核细胞获得的B淋巴母细胞系；

所述的转换为：调整外周血单个核细胞密度为5×10⁵/ml，加入等体积B95-8细胞系培养上清，培养3～4周，每周添加含体积分数20％FCS的RPMI1640，直至形态学观察确认转化成功。

6.如权利要求5所述的HTNV-NP特异性的CTL表位肽致敏的抗原提呈细胞，其特征在于，所述的外周血单个核细胞为预先在液氮中，在转化前复苏。