[发明专利]3,4,5,-三取代氨基噻吩类化合物及其制备和用途

说明书

技术领域

本发明属有机化合物的合成，涉及一类3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物的制备方法，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。 

背景技术

随着全球人口的不断增加和人口老龄化趋势的不断加深，同时也因为包括吸烟在内的各种不健康生活方式的广泛存在，肿瘤已经成为了发达国家威胁人类健康的头号杀手和发展中国家威胁人类健康的第二号杀手(Jemal，et al.，CA-Cancer J.Clin.2011，61，69-90)。传统的化学治疗药物如烷化剂、抗代谢物等普遍存在毒副作用大、易产生耐药性等缺点，而针对信号通路中的关键蛋白或激酶而设计的抗肿瘤药物正在肿瘤治疗领域取得令人鼓舞的效果。 

p53作为一个重要的肿瘤抑制因子在阻止癌症发展的过程中起到了关键作用。p53主要通过细胞周期阻滞和促使细胞凋亡两个方面来发挥其功能。近20多年来，许多实验证明阻断p53-MDM2(p53的一个主要的负调节子)的相互作用可以有效的重新活化肿瘤细胞中的p53，从而达到杀死肿瘤细胞的效果。过去十年，许多结构种类的小分子化合物被发现具有抑制p53-MDM2相互作用的活性并且具有不同程度的抗癌活性，并已有两个化合物进入了临床研究，这更加验证了该治疗策略的有效性(Wang，et al.，Medicinal Research Reviews.DOI10.1002/med.20236)。本课题组设计并合成了一系列全新的p53-MDM2相互作用的小分子抑制剂，以3，4，5-三取代氨基噻吩类化合物作为其结构特点，并对该类化合物进行了蛋白水平以及细胞水平的抗肿瘤活性研究。结果表明该类化合物具有明显的阻断p53-MDM2相互作用的活性以及细胞增值抑制活性，是有前景的p53-MDM2相互作用抑制剂，为癌症治疗药物的研究提供了新的思路。 

发明内容

本发明的目的是提供一类结构新颖的3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物及其盐，具有如下结构通式A： 

其中： 

R₁选自氢原子、氯原子或硝基； 

R₂选自氯原子或溴原子； 

R₃选自甲氧基、乙氧基、苯胺基、苄胺基、环丙胺基、环己胺基，4-羟基-环己胺基、吡咯烷环、吗啉环、哌啶环、4-甲基哌啶环、哌嗪环、4-甲基哌嗪环、2-哌啶酮环，4-哌啶酮环或2，4-二哌啶酮环中的一种。 

本发明的另一个目的是提供3，4，5，-三取代氨基噻吩类化合物的制备方法，通过以下步骤实现： 

(1)化合物I(可直接购买)与取代苯在惰性溶剂中经路易斯酸(Lewis)催化得中间体酰化产物II，该反应通常以乙醚、二氧六环、二氯甲烷、氯仿等为溶剂，所用的Lewis酸有氯化铁、氯化锌、氯化铝、氯化锡、三氟化硼乙醚等。反应温度为-15℃-25℃，反应时间8-12小时，所得产物II经重结晶可得纯品； 

(2)化合物II在酸性或者碱性条件下可与氰基乙酸甲酯缩合得到化合物III，经后处理后无需纯化可直接用于下一步反应。反应通常在中等极性溶剂如四氢呋喃(THF)中进行，常用的碱有二乙胺、三乙胺、二异丙基乙胺等，常用的酸有四氯化钛，氯化锡，三氟化硼乙醚等，反应温度可以在0℃-50℃之间进行，反应时间为12-24小时，所得产物为Z式和E式的混合物，无需分离可直接用于下一步反应； 

(3)化合物III在碱性条件下与硫粉环合得化合物IV，反应通常在极性非质子性溶剂中进行，如丙酮和THF等，常用的碱有二乙胺、三乙胺、二异丙基乙胺等，反应温度为0℃-50℃，所得产物经重结晶可得纯品； 

(4)化合物IV在碱性条件下水解得化合物V，反应在极性溶剂中进行，如甲醇、乙醇和二氧六环等，常用的碱有氢氧化钾，氢氧化钠和氢氧化锂等。反应可以在40℃-80℃之间进行，得到粗产物通过重结晶可得纯品； 

(5)化合物V在缩合试剂作用下与胺类化合物反应得目标产物VI，常用的缩合试剂有DCC(二环己基碳二亚胺)/DMAP(4-二甲氨基吡啶)，EDCI(N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐)/HOBt(1-羟基苯并三氮唑)，HCTU(6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲 六氟磷酸酯)等，反应温度为20℃-60℃，反应时间为12-24小时，粗产品经过柱层析可得到纯品。胺类化合物选用苯胺、苄胺、环丙胺、环己胺，4-羟基-环己胺、吡咯烷、吗啉、哌啶、4-甲基哌啶、哌嗪、4-甲基哌嗪、2-哌啶酮，4-哌啶酮或2，4-二哌啶酮中的一种。 

反应式一：