[发明专利]对谷类中雪腐镰刀菌烯醇的提取纯化检测方法有效
申请号: | 201110336605.4 | 申请日: | 2011-10-31 |
公开(公告)号: | CN102507774A | 公开(公告)日: | 2012-06-20 |
发明(设计)人: | 杨丹;耿志明;马鸿翔;姚金保;张旭;张平平 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 孙忠浩 |
地址: | 210014*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 谷类 中雪 镰刀 菌烯醇 提取 纯化 检测 方法 | ||
1.一种对谷类中雪腐镰刀菌烯醇的提取纯化检测方法,首先将被测谷类样品粉碎后用水振荡提取,然后对提取液进行纯化,再采用高效液相 色谱-紫外检测法对谷类样品中的雪腐镰刀菌烯醇进行定性定量分析,其特征在于:称取粉碎后的谷类样品5.0g于50ml的离心管中,加入25ml的H2O振荡提取20min,提取液在3000rpm下离心10min,弃沉淀,取10ml上清液加入等体积的无水乙醇4℃沉淀1h,在10000rpm下离心15min,弃沉淀,取上清液在50℃下旋转蒸干,1.0ml H2O分两次振荡提取,合并提取液2.0ml,经规格为3ml/60mg的Waters OASIS HLB固相萃取小柱进一步纯化,按照小柱使用说明书的要求对小柱进行活化和上样,用3.0ml H2O洗涤,然后在真空下抽气干燥20 min;再用2.0 ml甲醇洗脱小柱,收集洗脱液,均自然流速,将洗脱液在50℃下旋转蒸干后,用0.5ml水溶解,最后过0.22μm微孔滤膜,上机待测。
2.根据权利要求1所述的对谷类中雪腐镰刀菌烯醇的提取纯化检测方法,其特征在于:高效液相色谱-紫外检测法的条件为:色谱柱:C18;流动相:10%乙腈水溶液;流速:0.8ml/min;柱温:35℃;进样量:10μl;紫外检测器:224nm。
3.根据权利要求1所述的对谷类中雪腐镰刀菌烯醇的提取纯化检测方法,其特征在于:所述的谷类是指:玉米或麦类。
4.根据权利要求1~3之一所述的对谷类中雪腐镰刀菌烯醇的提取纯化检测方法,其特征在于:所述的对谷类样品中的雪腐镰刀菌烯醇进行定性定量分析是指:在高效液相色谱图中,雪腐镰刀菌烯醇标样与被测谷类样品进行对比,根据标样的出峰时间定性,根据峰面积进行定量分析。
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