[发明专利]一种分离培养嗅鞘细胞的试剂盒

权利要求书

1.一种分离培养嗅鞘细胞的试剂盒，包括：

洗涤液：本发明所述的洗涤液为ACSF(人丁脑脊液)，4℃保存。

培养液A：本发明所述的培养基A为DMEM基础培养基。

培养液B：本发明所述的培养液B为胎牛血清(美国GIBCO公司)。

细胞消化液：本发明所述消化液为89％胰酶，10％DNA酶，1％肝素。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述洗涤液、培养液以及细胞消化液是无菌的。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述洗涤液、培养液以及细胞消化液是独立包装。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述嗅鞘细胞源自于哺乳动物。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述培养液的技术指标如下：渗透压(240-340mOsm/kg)、pH(7.0-7.5)、总蛋白含量(3-3.5g/100ml)、血红蛋白(≤20mg/100ml)

6.权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述培养液为培养液A与培养液B的混合培养基。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液为0.01M，所述细胞消化液以质量/体积百分比浓度0.25％的胰蛋白酶液为主，内含DNA酶和肝素。

8.一种分离嗅球细胞的方法，包括：

1)利用传统分离法获得嗅鞘细胞，经细胞培养混合液培养获得原代细胞的嗅球细胞。

2)利用洗涤液冲洗步骤1)获得的嗅球细胞，随后用细胞消化液消化，经传代培养获得传代培养的嗅球细胞；

3)利用细胞消化液对步骤2)获得的传代培养的嗅球细胞进行消化，获得分离的嗅球细胞，其中洗涤液为ACSF(人工脑脊液)；细胞培养混合液为按照9∶1体积比来配制的培养液A与培养液B，其中培养液A为DMEM，B为胎牛血清；以及细胞消化液(89％胰酶，10％DNA酶，1％肝素)。

9.根据权利要求8所述的方法，其中在步骤1)中，采用24小时半量更换细胞培养混合液。

10.根据权利要求8所述的方法，其中在步骤2)中，传代培养使细胞密度达到90％。