[发明专利]胚胎肾脏的体外器官培养方法有效
| 申请号： | 201110345247.3 | 申请日： | 2011-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN102391983A | 公开（公告）日： | 2012-03-28 |
| 发明（设计）人： | 周钦;吕小岩;陈铁林;孙环;魏于全 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073 |
| 代理公司： | 成都虹桥专利事务所 51124 | 代理人： | 梁鑫 |
| 地址： | 610041 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胚胎 肾脏 体外 器官 培养 方法 | ||
1.哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于包括以下步骤：
a、在多孔培养板的培养孔中放入尺寸与之适配的承载片，在培养孔底部构建出培养空间；
b、将取得的哺乳动物胚胎肾脏放置于承载片上，加入培养基，使肾脏处于培养基和空气的气-液交界处；
c、36℃～38℃培养箱中培养，然后每1到2天进行培养基换液。
2.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：步骤a所述的多孔培养板为24孔培养板。
3.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：在使用多孔培养板的各孔间隙加入湿度平衡液，以减缓培养基挥发。
4.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：步骤b中加入培养基后调整承载片于培养孔的底部的中心，哺乳动物胚胎肾脏位于承载片的中部。
5.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：步骤c中所述的培养基采用半量递增的方式换液，即每次换液时保留上次培养基体积的一半在原培养孔中，然后将比上次培养基体积的一半按体积分数还多增加6％-12％的新鲜培养基加入培养孔。
6.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：步骤a所述的承载片为透明玻璃圆片。
7.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：所述湿度平衡液为无菌的磷酸盐缓冲液或蒸馏水。
8.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：所述胚胎肾脏为分离的胚胎期10～13天的小鼠肾脏原基。
9.根据权利要求1所述的哺乳动物胚胎肾脏的体外器官培养方法，其特征在于：将肾脏平放。
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