[发明专利]一种复合棉麻杆生物活性垫料及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物发酵领域，尤其涉及一种利用微生物发酵制得的复合棉麻杆生物活性垫料，以及它的制备方法。

背景技术

一般生物垫料主要成分是菌种，花生壳，玉米秸秆和稻草等，其制备方法是通过将花生壳，玉米秸秆和稻草先混合，然后再加入一定量菌种和饮用水混合制备而成。使用到的菌种一般为纳豆菌、地衣芽孢杆菌。但是这种生物垫料使用时间不是很长，容易腐烂；分解效果不明显。

发明内容

本发明的目的在于克服现有生物垫料的缺陷，提供一种可以长期使用，分解能力较高的新型复合棉麻杆生物活性垫料以及它的制备方法。

本发明的另一目的，还在于提供一种在所述复合棉麻杆生物活性垫料中使用的一种复合微生物菌剂，以及它的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供的一种复合微生物菌剂，是由枯草芽孢杆菌和酿酒酵母的混合发酵液吸附到黄豆粉上制成的；所述混合发酵液的有效活菌总数为80-100亿个/ml，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数为70-80％，酿酒酵母的有效活菌数为20-30％；所述混合发酵液与黄豆粉的体积质量比为：(30-40)∶(1-2)。

其中，所述混合发酵液与黄豆粉的体积质量比优选为：35∶1。

上述混合发酵液与黄豆粉的体积质量比是根据L∶g来推算的。

所述复合微生物菌剂还可以包括其他载体，如玉米粉或麦麸等。

本发明所述的复合微生物菌剂的制备方法，是将酿酒酵母、枯草芽孢杆菌分别进行斜面培养，一级种子培养和二级种子培养，再在发酵罐中进行混合发酵培养后吸附黄豆粉，得到所述复合微生物菌剂。

具体地，包括如下步骤：

1)斜面培养，包括将酿酒酵母、枯草芽孢杆菌原始菌种分别接种于固体培养基上进行培养；

2)一级种子培养，包括将步骤1)培养的酿酒酵母、枯草芽孢杆菌各菌种分别接种于培养基上，制得酿酒酵母、枯草芽孢杆菌的一级种子；

3)二级种子培养，包括将步骤2)培养的酿酒酵母、枯草芽孢杆菌一级种子分别接种到含培养基的发酵罐中进行培养，制得酿酒酵母、枯草芽孢杆菌的二级种子；

4)混合发酵培养，包括将步骤3)培养的酿酒酵母、枯草芽孢杆菌二级种子逐个接种到含培养液的发酵罐中，进行高密度发酵培养后吸附黄豆粉，获得本发明所述复合微生物菌剂。

其中，步骤1)斜面培养中，所述酿酒酵母、枯草芽孢杆菌的固体培养基均为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂18g，加水至1000ml。

其中，步骤1)斜面培养中，将酿酒酵母30℃条件下培养3天。

其中，步骤1)斜面培养中，将枯草芽孢杆菌37℃条件下培养2天。

其中，步骤2)一级种子培养中，所述酿酒酵母的培养基为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，加水至1000ml。

其中，步骤2)一级种子培养中，所述枯草芽孢杆菌的培养基为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂18g，加水至1000ml。

其中，步骤2)一级种子培养中，酿酒酵母30℃条件下，150r/min摇床培养3天。

其中，步骤2)一级种子培养中，枯草芽孢杆菌37℃条件下静止培养2天。

其中，步骤2)一级种子培养中，结束培养时酿酒酵母、枯草芽孢杆菌各菌种悬液光密度(OD600)值均达到4.0，表面菌种生长情况较好。

其中，步骤3)二级种子培养中，一级种子的接种量为步骤2)所述液体培养基体积的10％。

其中，步骤3)二级种子培养中，发酵罐内酿酒酵母的培养基为胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，加水至1000ml。

其中，步骤3)二级种子培养中，发酵罐内枯草芽孢杆菌的培养基为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂18g，加水至1000ml。

其中，步骤3)二级种子培养中，发酵罐内培养液的总体积为60L。

其中，步骤3)二级种子培养中，酿酒酵母30℃条件下，搅拌速度为150r/min，通气量为1∶1，培养3天。

其中，步骤3)二级种子培养中，枯草芽孢杆菌37℃条件下培养2天。

其中，步骤4)混合发酵培养中，二级种子的接种量为步骤3)所述液体培养基体积的15％。