[发明专利]J亚群禽白血病抗体快速检测试纸卡及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种J亚群禽白血病抗体快速检测试纸卡，通过检测鸡群J亚群禽白血病抗体，从而回顾性地判断鸡群是否感染过J亚群禽白血病病毒。

背景技术

J亚群禽白血病是由J亚群禽白血病病毒（ALV-J）感染引起的一种肿瘤性传染病。ALV-J是具有囊膜的反转录病毒禽临床感染主要表现为髓细胞瘤、免疫耐受、高死亡率和生长迟缓。1997～1998年间，ALV-J呈全球性爆发，对世界肉种鸡业造成了毁灭性打击。ALV-J感染除引起髓细胞瘤外，成红细胞瘤、血管瘤、肾瘤、和肉瘤常在感染后期伴随发生，通常死亡率为1％～5％，高峰期可达50％。研究证实，ALV-J对免疫应答具有持久损害作用，使生产力低下，继发感染和混合感染频发，J亚群禽白血病给家禽养殖业带来极大的风险。

1、J亚群禽白血病在我国频发

我国白羽肉种鸡均从国外引进，且未对新出现的ALV-J采取任何防范措施，加之我国的养殖条件相对落后，使ALV-J在我国造成的损失高于其它任何国家。2000年，J亚群禽白血病在我国白羽肉种鸡中全面爆发，造成了巨大的经济损失；2002－2005年间，ALV-J病毒突破种间屏障，造成广东、广西三黄鸡、中国麻鸡鸡群中爆发J亚群禽白血病，使许多养殖场倒闭；2007年和J亚群禽白血病密切相关的血管瘤病在蛋鸡群及商品蛋鸡群中爆发，并很快席卷全国。J亚群禽白血病在我国鸡群中流行发生具有一下特点：

1）感染率及发病率居高不下。近10年来，在肉种鸡、蛋种鸡中感染率均在10％左右；2）混合感染促使病毒重组率增高。调查显示，禽白血病与马立克氏病、网状内皮增生症病的混合感染日趋严重，为临床诊断带来了困难；3）早期感染普遍、发病日龄明显提前。目前在青年鸡群或开产前的鸡群中J亚群禽白血病已成为常见病；4）宿主范围扩展。爆发血管瘤的蛋鸡、我国特有鸡种麻鸡、柴鸡及芦花鸡中也检出ALV-J，这表明了J亚群禽白血病正在向蛋鸡、地方鸡种传播，其宿主范围正在明显扩大；5）肿瘤趋于多样化。目前，我国感染禽群中出现了诸多以前罕见的肿瘤，如血管瘤、成红细胞瘤、肝细胞癌、腺癌、纤维瘤、皮肤癌和输卵管癌等；6）致病性增强。许多在蛋鸡及地方鸡中发现的肿瘤要比之前肉种鸡的病变更加严重，在肉鸡体内的某些器官内从未发现髓细胞瘤，而在蛋鸡中比较常见，如颈部髓细胞瘤、 腰荐髓细胞瘤肠髓细胞瘤等。

2、J亚群禽白血病的防控现状

一直以来，由于ALV-J病毒自身的特殊性以及引起疾病的复杂性，对ALV-J的防治研究未见显著成就，至今无法控制ALV-J的有效方法和防治ALV-J感染的药物和疫苗。对ALV-J的防控，发达国家主要采取净化淘汰，1997～1998年，全球爆发ALV-J后，世界4大养禽公司先后投入巨额资金研究防制ALV-J策略，最终制定出一套严格的净化措施，逐步控制了ALV-J的持续爆发；2002年后，ALV-J祖代种鸡群中已基本净化干净，但在商品肉鸡中还有零星的爆发，其每周发病率在1.5％左右。控制ALV-J是一个长期不懈的工作。在目前状况下，我国对ALV-J基本上没有行之有效的防控措施，政府没有补贴，也没有哪个公司能承担起高昂的净化费用。

3、J亚群禽白血病的检测技术

目前，检测ALV-J常用方法为PCR和免疫检测。PCR方法对检测人员技术水平、设备有较高的要求，成本高，操作复杂，易出现假阳性和假阴性，不适合临床快速检测。ALV-J免疫检测以抗原－抗体特异性结合为基础，主要以酶联免疫吸附（ELISA）和胶体金两种检测技术为研究热点，胶体金试纸卡具有方便、快捷、灵敏、经济实惠等特点。

    免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，已得到较为广泛的应用，基本原理为：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试纸卡的硝酸纤维素膜上包被相应的配对抗体或抗原，检测时，当样品中含有相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在硝酸纤维素膜上层析，再被包被的抗体或抗原捕获，胶体金颗粒富集，形成肉眼可见的检测线（T线），通过检测线的有无来判断结果，同时在离检测线不远的后方设立另一可与金标物特异性结合的抗体或抗原作为质控线（C线）。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术而提供了一种J亚群禽白血病抗体快速检测试纸卡，其以鸡血清为检测样品，可简便、快速地检测鸡群是否感染过ALV-J，为鸡群特别是种鸡的ALV-J净化提供快捷工具，降低了净化成本，节约人力物力。