[发明专利]一种多表位TK1抗体的制备及其在肿瘤患者早期复发风险及预后评估中的应用

权利要求书

1.一种高特异性、高灵敏度的抗人TK1抗体，其特征在于所述抗体选择的TK1蛋白包括：TK1蛋白质，具有酶活性/非活性的单体、2或4聚体TK1蛋白质，或TK1蛋白质与其他分子形成的蛋白复合物或抑制物。

2.一种抗原决定簇，所述决定簇包括人宫颈癌细胞TK1单体N端23肽、C端20肽和C端28肽，其氨基酸序列分别如下：N端23肽(3-25)：CINLPTVLPGSPSKTRGQIQVIL；C端20肽(206-225)：CPVPGKPGEAVAARKLFAPQ和C端28肽(198-225)：AGPDNKENCPVPGKPGEAVAARKLFAPQ。

3.一种利用权利要求2所述的抗原决定簇制备抗体的方法，其特征在于所述方法包括利用权力要求2所述的三个氨基酸免疫序列分别与KLH交联，分别免疫母鸡，提取卵黄液体，采用水萃取制备抗体溶液，分别用所述的抗原决定簇制备的亲和层析柱纯化抗体，初筛出高特异性、高灵敏度的抗体。

4.一种利用权利要求3所述的方法所得的组合抗体制备的高特异性、高灵敏度的多表位抗人TK1-IgY抗体，其特征在于所述的抗体按质量百分数计：所述23肽免疫的单一抗体为30％～45％，所述20肽免疫的单一抗体为25％～40％，28肽免疫的单一抗体为20％～35％。

5.一种利用权利要求3所述的方法所得的组合抗体制备的高特异性、高灵敏度的多表位抗人TK1-IgY抗体，其特征在于所述的抗体按质量百分数计：所述23肽免疫的单一抗体为30％～35％，所述20肽免疫的单一抗体为30％～35％，28肽免疫的单一抗体为30％～35％。

6.一种用权利要求3至5中任一权利要求所述的抗体，其特征在与所述的抗体选择的TK1蛋白包括：TK1蛋白质，具有酶活性/非活性的单体、2或4聚体TK1蛋白质，或TK1蛋白质与其他分子形成的蛋白复合物或抑制物。

7.一种对权利要求4中所述的配位组合的抗人TK1-IgY抗体的检测方法：所述检测方法包括硝酸纤维素膜点印染/免疫增强发光检测系统(ECL)的缩时检测方法、抗体直接标记生物素方法。

8.一种利用权力要求4至5中任一权利要求所述的组合抗人TK1-IgY抗体与化学发光检测系统结合用于评估肿瘤患者早期复发风险及预后的试剂盒。