[发明专利]一种提高植物中纤维生物质能源利用效率的方法

权利要求书

1.一种培育转基因植物的方法，是降低目的植物中咖啡酰CoA 3-O-甲基转移酶编码基因的表达，得到与所述目的植物相比，细胞壁组分变化和糖化效率提高的转基因植物；所述细胞壁组分变化体现为：酸不溶木质素含量降低、酸溶木质素含量降低和纤维素含量增加；所述糖化效率提高体现为：纤维素的酶解效率提高。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述咖啡酰CoA 3-O-甲基转移酶为由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述咖啡酰CoA 3-O-甲基转移酶的编码基因为如下1)-3)中任一所述的基因：

1)序列表中序列1所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)所示的DNA分子杂交且编码序列表中序列2所示氨基酸序列组成的蛋白的基因；

3)与1)或2)的基因具有90％以上的同源性且编码序列表中序列2所示氨基酸序列组成的蛋白的基因。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述降低目的植物中咖啡酰CoA 3-O-甲基转移酶编码基因的表达是通过将咖啡酰CoA 3-O-甲基转移酶编码基因的反义基因导入目的植物中实现的。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述咖啡酰CoA 3-O-甲基转移酶编码基因的反义基因的核苷酸序列与序列表中序列1所示的核苷酸序列反向互补。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述降低目的植物中咖啡酰CoA 3-O-甲基转移酶编码基因的表达是通过将重组表达载体pASCCoAOMT1导入目的植物中实现的；

所述重组表达载体pASCCoAOMT1是通过包括如下步骤的方法制备得到的：

(1)在GUS基因片段的5′端引入BamHI和SpeI酶切位点和3′端引入SacI和SalI酶切位点，得到GUS′基因片段；将所述GUS′基因片段插入载体pBI121的BamHI和SacI位点间，替换载体pBI121上的GUS基因，得到中间重组载体；

(2)将与序列表中序列1所示的核苷酸序列反向互补的DNA序列沿着从XbaI至SalI的方向插入所述中间重组载体的XbaI和SalI位点间，得到的重组载体pASCCoAOMT1。

7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述植物为单子叶植物或双子叶植物；所述双子叶植物为毛白杨(Populus tomentosa)。

8.一种重组表达载体，是通过包括如下步骤的方法制备得到的：

(1)在GUS基因片段的5′端引入BamHI和SpeI酶切位点和3′端引入SacI和SalI酶切位点，得到GUS′基因片段；将所述GUS′基因片段插入载体pBI121的BamHI和SacI位点间，替换载体pBI121上的GUS基因，得到中间重组载体；

(2)将与序列表中序列1所示的核苷酸序列反向互补的DNA序列沿着从XbaI至SalI的方向插入所述中间重组载体的XbaI和SalI位点间，即得到的所述重组表达载体。

9.权利要求8所述的重组表达载体在使植物细胞壁组分变化和糖化效率提高中的应用；所述细胞壁组分变化体现为：酸不溶木质素含量降低、酸溶木质素含量降低和纤维素含量增加；所述糖化效率提高体现为：纤维素的酶解效率提高。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述植物为单子叶植物或双子叶植物；所述双子叶植物为毛白杨(Populus tomentosa)。