[发明专利]发酵云芝高产EPS的培养基配方及其在卷烟中的应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种液体发酵云芝生产胞外多糖的工艺及胞外多糖的应用。

背景技术

云芝(Coriolus versicolor)又名彩绒革盖菌、杂色云芝、彩绒菌和瓦菌等，隶属非褶菌目，多孔菌科，栓菌属。子实体一般较小，无柄，呈覆瓦状排列。云芝是中药和食品中用途最为广泛的真菌之一，具有健脾利湿、止咳平喘、清热解毒、抗肿瘤等功能。云芝中含有多种生理活性成分，其中最主要的成分之一就是云芝多糖。云芝多糖分子量在10万以上，是富含β-(1，3)糖苷键的葡聚糖，同时含有甘露糖、木糖、半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖。大量的研究资料表明云芝多糖成分是一类具有多种生物活性的多糖物质，具有多种药理和生理功能，功效显著，药用价值高，可做各类药品、保健品、功能性食品的原料。大量研究表明，云芝多糖具有抗细菌、霉菌及病毒的功能，刺激巨噬细胞转化，增加血液里的白细胞介素I、γ干扰素及肿瘤坏死因子的作用，能抑制癌细胞生成，是一种新型的抗肿瘤免疫调节剂，能激活免疫细胞，提高机体免疫功能而对正常细胞，没有毒副作用。云芝多糖是国际公认的高效免疫促进剂，是一种口服有效的多糖，临床可用于治疗慢性乙型肝炎、酒精肝，加强消化系统、肺及宫颈、乳腺等部位的癌症放化疗作用，可明显提高患者的细胞免疫功能和体液免疫功能，增强机体对化学治疗的耐受性减少感染与出血，提高患者生命质量。云芝多糖同时具有保肝护肝作用，可显著降低血清转氨酶，对肝组织病变和肝坏死有明显的修复作用。

云芝多糖包括三类，一是从云芝的子实体中提取的粗多糖(CVPS)，二是从云芝深层培养菌丝体中分离到一种结合蛋白多糖(PSK)(又称为云芝肽糖)，三是从液体发酵云芝的发酵液中提取的云芝胞外多糖(EPS)。从云芝菌丝体和发酵液中提取的多糖均具有极强烈的抑制癌细胞活性，抗氧化活性和免疫调节功能，是良好的免疫增强剂，可提高动物机体IgM的量等作用；而云芝糖肽的抗肿瘤作用、免疫增强作用和保护肝脏的作用也已普遍用于临床。在临床上，云芝多糖具有安全性高、毒副作用小、适用面广和对机体损害小等优点，已作为一种免疫疗法用药应用于慢性乙型肝炎，消化系统、呼吸系统疾病及宫颈和乳腺等部位癌症疾病的治疗和辅助治疗。将云芝多糖开发为天然药物免疫促进剂和调节剂应用于其他疾病的防制方面具有更广阔的前景。近年来人们对云芝子实体和发酵菌丝体多糖的提取方法、功能和应用等已进行了大量的研究，但就发酵云芝生产胞外多糖(EPS)和EPS功能及应用方面的研究还很少。

随着世界范围内反吸烟运动的不断深入和人类对自身健康的关注，“吸烟与健康”已经成为医药界和烟草界共同面临的重大难题，是烟草行业所面临的主要挑战及当今社会广泛关注的焦点。近年来，随着履行《烟草控制框架公约》工作的启动，社会对吸烟与健康问题的关注不断加强，减少吸烟对健康的危害已成为烟草行业必须承担的责任和义务。目前国内已在中草药选择、药物作用机理以及临床应用效果上对中国特有的新型卷烟进行了深入的研究，研制开发成功对人体某些疾病具有一定疗效商业卷烟，如“金圣”、“五叶神”、“江山”等。这些卷烟除对缓解人体呼吸系统疾病有一定良性作用外，还可对心血管系统疾病等有一定的预防作用。还有研究表明，含有云芝等类中草药有效成分的卷烟在燃吸时，其有效成分被蒸馏、气化、挥发和升华形成微粒相和气相，可捕获烟气中的自由基，阻断或降低有害物质的生成，减轻吸烟引起的心血管和微循环系统的危害。因此，烟用中草药的研究目前已成为各烟草企业和科研院所研究的热点之一。但目前，还未见发酵产云芝胞外多糖用于卷烟中的相关报道。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种发酵云芝高产EPS的培养基配方。

本发明的另一目的在于提供一种液体发酵云芝培养物的方法及从云芝培养发酵液中分离纯化胞外多糖的方法。

本发明的再一目的是公开了云芝胞外多糖在卷烟中的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的发酵云芝高产EPS的培养基配方为：多价胨4-7g/L，麦芽糖50-55g/L，起始pH为5。

优选为：多价胨5.870g/L，麦芽糖53.120g/L，起始pH为5。

本发明的液体发酵云芝培养物的方法，以4％的接种量将种子培养液接种于基础培养基中培养，培养基配方为多价胨4-7g/L，麦芽糖50-55g/L，起始pH为5，在28℃，150r/min条件下培养7-9天。