[发明专利]类人胶原蛋白及注射型类人胶原蛋白软组织填充材料

说明书

技术领域

本发明属于蛋白质工程、生物医用材料领域，具体涉及类人胶原蛋白、注射型类人胶原蛋白软组织填充材料及其制备方法。

背景技术

整形美容行业正随着人们生活水平的不断提高而快速发展，隆胸、隆鼻、除皱、脸部整形等都受人追捧。目前面部整形的需求包括：祛除皱纹，改善面部轮廓，填平凹陷瘢痕或唇部，修复受伤的组织等。因此，软组织填充材料市场需求量大。

在19世纪90年代至今，人们先后研究了白蜡、脂肪移植、硅树脂、凝胶植入体等材料用于软组织整形，临床应用发现：都存在着硬化，瘤状肿块、吸收过快、慢性炎症等问题。近些年来，美国FDA相继批准了几个用于软组织填充的产品，其主要成分为牛胶原、透明质酸钠、PMMA小球等，已经有了较好的效果，对于部分使用者仍然存在着使用部位红肿、过敏及降解过快等情况。

胶原蛋白，又称为胶原，是脊椎动物体内含量最丰富、分布最广泛的一组硬蛋白，是脊椎动物身体结构的重要材料，也是在哺乳动物中含量最丰富的蛋白。胶原由多糖蛋白分子组成，是结缔组织的主要蛋白成分，占机体总蛋白的20～30％。机体中大约一半的胶原蛋白存在于皮肤中，胶原蛋白占真皮和筋腱干重的70％，相当于体重的6％。类人胶原蛋白是将人体已知序列胶原蛋白的一段mRNA逆转录生成cDNA后，经过特定序列重复和修饰，转化于大肠杆菌中，并经过高密度发酵、分离提取及纯化而得，由西安巨子生物基因技术股份有限公司发明并独家生产(中国发明专利号ZL.01106757.8)。它从根本上解决了动物提取胶原蛋白的水不溶性和病毒隐患(疯牛病、猪瘟疫、禽流感)。

透明质酸钠是广泛存在于动物和人体的生理活性物质，在人皮肤、关节滑膜液、脐带、房水及眼玻璃体中均有分布。其溶液具有高黏弹性及仿形性，是目前公认的生物相容性极好的生物医用材料，为眼科手术的辅助剂，并有保护角膜内皮细胞及眼内组织，减少手术并发症，促进伤口愈合的作用。

羟基磷灰石，又称羟磷灰石，是钙磷灰石(Ca₅(PO4)₃(OH))的自然矿物化。但是经常被写成(Ca₁₀(PO₄)₆(OH)₂)的形式以突出它是由两部分组成的：羟基与磷灰石。羟基磷灰石具有良好的理化性质和生物学性质，使它广泛地应用于许多领域。羟基磷灰石作为无机材料的涂层和复合材料的无机基体的使用材料，赋予了材料良好的生物学性质和一定的机械力学性质而广泛应用于生物材料，现在广泛应用于人工骨等产品的开发。

发明内容

本发明的目的是提供一种注射型类人胶原蛋白软组织填充材料及其制备方法，该材料制备工艺简单，所制备的类人胶原蛋白软组织填充材料稳定新好、生物相容性优异，无病毒隐患，软组织填充及修复效果好。

本发明人经过深入研究发现：类人胶原蛋白、透明质酸钠和羟基磷灰石均具有良好的生物相容性，三者以适当的配比进行复合，制备得到的类人胶原蛋白软组织填充材料具有无病毒隐患、生物相容性好，可刺激手术部位细胞适量增殖等特点，具有良好的软组织填充效果，从而完成了本发明。

即，本发明如下：

1.一种重组胶原蛋白，其由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成。

2.编码项1所述的重组胶原蛋白的核酸。

3.导入了项2所述的核酸的载体。

4.用项3的载体转化宿主细胞而得到的转化体。

5.一种注射型类人胶原蛋白软组织填充材料的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将类人胶原蛋白用注射用水溶解成质量分数为1.0％～5.0％的溶液；

2)将医用透明质酸钠用注射用水溶解成质量分数为0.5％～2.0％的溶液；

1)将上述两种溶液按一定比例混合后再加入一定量的医用级羟基磷灰石，混合搅拌，在搅拌的过程中添加适量的医用级甘油，混合均匀后真空脱泡，得到成品。

6.根据权利要求5所述的注射型类人胶原蛋白软组织填充材料的制备方法，其特征在于：所述类人胶原蛋白是权利要求1所述的重组胶原蛋白。

7.根据权利要求5所述的注射型类人胶原蛋白软组织填充材料的制备方法，其特征在于：所述医用透明质酸钠的分子量为100万～250万。

8.根据权利要求5所述的注射型类人胶原蛋白软组织填充材料的制备方法，其特征在于：所述医用级羟基磷灰石为球形，其直径是20～80μm。