[发明专利]一种大黄鱼干扰素（IFN）基因及其克隆方法无效
| 申请号： | 201110363640.5 | 申请日： | 2011-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN102559695A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 姚翠鸾;李婵;王志勇 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12N15/20 | 分类号： | C12N15/20;C12N15/10 |
| 代理公司： | 厦门市新华专利商标代理有限公司 35203 | 代理人： | 朱凌 |
| 地址： | 361021 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 大黄鱼 干扰素 ifn 基因 及其 克隆 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种大黄鱼干扰素基因，其特征在于：其蛋白编码区的cDNA序列，具有序列表中SEQ ID NO.1碱基序列及SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
2.一种如权利要求1所述的大黄鱼干扰素基因的克隆方法，其特征在于包括如下步骤：
(1) 从大黄鱼的肝脏和皮肤组织中提取总RNA；
(2) 然后进行cDNA第一链合成；
(3) 根据硬骨鱼类IFN的同源片段序列设计引物进行嵌套聚合酶链式PCR反应，得到大黄鱼IFN基因片段，其中正向引物F1：5’ ATGCTCAACAGGATTTTCT 3’，F2 5’GGCTAATAACTCCACTAAC 3’，反向引物R1：5’TCAGCTCCCAGGCTTCAGC 3’, R2 5’TGTGTTCTCCTCCCATGA 3’；
(4) 又用2条基因特异性正向引物3F1：5’ACAGCCAGGCGTCCAAAG 3’, 3F2：5’ TCAGGTTCTGGAGGAGGC 3’ 进行大黄鱼IFN cDNA 3’端快速扩增（3’RACE）；
(5) 然后用2条基因反向引物R1 5’TCAGCTCCCAGGCTTCAGC3’： R2：5’TGTGTTCTCCTCCCATGA 3’进行对大黄鱼IFN cDNA 5’端克隆（5’RACE）。
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