[发明专利]4-羟基水杨酰苯胺在制备防治肝炎和抗肿瘤药物中的应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及4-羟基水杨酰苯胺在制备以核糖核苷酸还原酶(Ribonucleotide reductase，RR)为靶标的药物中的应用，尤其是4-羟基水杨酰苯胺在制备以RR酶为靶标的防治肝炎的药物和抗肿瘤药物中的应用。

(二)背景技术

慢性肝炎是威胁全球人类健康的严重传染性疾病之一。全世界约有20多亿人曾感染乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)，每年由于HBV感染而死亡的人数达100万。HBV感染不仅是引起慢性乙型肝炎、而且是引起原发性肝癌的重要生物学因素。中国、东南亚及非洲是HBV感染的高发区，原发性肝癌的发生率显著高于美洲中部和南部等HBV感染的低发区。慢性乙型肝炎现有的治疗主要有干扰素、核苷类药物、胸腺素，但这些药物长期应用会出现较严重的毒副作用或产生耐药，且价格昂贵。因此，寻找新型、有效的抗HBV药物是急需解决的问题。

核糖核苷酸还原酶(Ribonucleotide reductase，RR)是细胞DNA合成限速酶。其功能是催化核糖核苷酸(NDPs)中核糖上C2位的羟基还原成氢，生成脱氧核糖核苷酸(dNDPs)。在细胞内，dNDPs经激酶作用生成三磷酸脱氧核苷(dNTPs)，为DNA合成提供原料。RR酶由2个相同的大亚基(α2)和两个相同的小亚基(β2)组成四聚体(α2β2)。R1(在人RR又称为M1)代表α2部分，R2(在人RR又称为M2)代表β2部分，哺乳动物中还有另一RR小亚基p53R2(在人RR又称为M2B)。已经证明，RR高表达，或由此造成的细胞内dNTPs库混乱，与肿瘤发生发展密切相关。而且，RR酶的高表达增加肿瘤治疗中的化疗抵抗。目前靶向针对RR酶治疗相关肿瘤已逐渐成为热点与重点。

HBV基因组为双链、部分环状的DNA，由长链和短链组成。HBV侵入机体后，在肝细胞内进行复制，在其复制过程中病毒前基因组RNA逆转录成为DNA并复制子代病毒DNA。HBV DNA合成需要以dNTPs为底物。HBV通常在静止肝脏细胞中复制较快，但静止肝脏细胞中的dNTPs含量较低，正常情况下无法满足HBV的复制。最近研究表明，HBV之所以能够在静止肝脏细胞中复制，是因其HBx蛋白能够阻断R2抑制性调节因子x1(Rfx1)的作用，在静止肝细胞中选择性激活R2基因表达，从而激活RR酶活性而使细胞能够生成大量dNTPs，供HBV在静止肝细胞中的自身复制需要，引起肝炎。

4-羟基水杨酰苯胺，其结构式为：

该化合物的分子式为C₁₃H₁₁NO₃，白色粉末状，分子量为229.24，CAS编号为526-18-1。该化合物的通用名为柳胺酚片，目前用于肝胆病用药，作用机制与去氢胆酸相似，能增加肝血流量，改善肝功能，可使胆汁中水分显著增加。利胆作用较去氢胆酸强，能使Oddi括约肌松弛。此外尚有降低血胆固醇作用。

(三)发明内容

本发明的目的在于提供4-羟基水杨酰苯胺的新用途，即4-羟基水杨酰苯胺在制备以核糖核苷酸还原酶(Ribonucleotide reductase，RR)为靶标的药物中的应用。

本发明采用的技术方案是：

4-羟基水杨酰苯胺在制备以核糖核苷酸还原酶(Ribonucleotide reductase，RR)为靶标的药物中的应用。

本申请人经实验研究发现，该化合物能有效抑制RR酶的活性，并且其能作为RR酶抑制剂，具有抑制肿瘤细胞生长的能力，可发展为肝炎和肿瘤的预防及治疗药物。

具体的，所述4-羟基水杨酰苯胺用于制备防治肝炎(尤其是乙型肝炎)的药物。

具体的，所述4-羟基水杨酰苯胺用于制备抗肿瘤药物。

更为具体的，所述4-羟基水杨酰苯胺可用于制备防治肝癌、口咽上皮癌、大肠癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、以及白血病的药物。

本发明化合物对RR酶的半数有效抑制浓度(IC₅₀)的测定结果见图1，对HepG2.2.15细胞的IC₁₀、IC₂₅及IC₅₀的测定见表2，对HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg的影响的测定见表3，对HepG2.2.15细胞中HBV-DNA的影响见表4。对各种肿瘤细胞的杀伤活性结果见图4～图10。该化合物可添加药物可接受的载体，制成常规的剂型如片剂、颗粒剂、针剂等。

本发明的有益效果主要体现在：

(1)本发明对已知药物4-羟基水杨酰苯胺发掘了新的医疗用途，开拓了多个新的应用领域。