[发明专利]基于微观动态离子流技术检测水稻真菌性立枯病的方法

权利要求书

1.一种基于微观动态离子流检测技术检测水稻真菌性立枯病的方法，其特征在于，利用微观动态离子流检测技术分别检测水稻根系K⁺、NH₄⁺和Ca²⁺的吸收能力，检测出感染真菌性立枯病的水稻，所述离子流流向处于外流或者是内流幅度较对照变小即为感染真菌性立枯病。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，检测使用的水稻处于幼苗期。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，微观动态离子流检测技术中测试缓冲液中的测试离子浓度为0.05～0.15mM。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，检测使用的水稻处于2叶1心期，测量位置为距所述水稻苗根尖300～500μm的根尖分生区的外表面20～50μm处。

5.根据权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)向微电极中灌入离子灌充液至充满所述电极尖端1cm，再将电极前端吸入相应的测试离子交换剂；

(2)将经过步骤(1)处理后的电极套入已氯化的Ag/AgCl电极线基座，并放入校正液中校正；

(3)取待测水稻苗，将其根部先放在测试缓冲液中平衡30min，再用校正后的电极对待测水稻苗进行检测10～15min；

(4)对检测结果进行处理和分析；

其中，步骤(1)所述离子灌充液为：80～140mM KCl、80～140mMNH₄Cl和80～140mM CaCl₂；步骤(1)电极的前端吸入的测试离子交换剂的长度为：K⁺100～200μm；NH₄⁺20～50μm和Ca²⁺15～30μm；

步骤(2)所述的校正液为：K⁺0.05～0.15mM KCl和0.5～1.5mMKCl；NH₄⁺：0.05～0.15mM NH₄Cl和0.5～1.5mM NH₄Cl；Ca²⁺：0.05～0.15mM CaCl₂和0.5～1.5mM CaCl₂；

步骤(3)所述的测试缓冲液为：K⁺或Ca²⁺：0.05～0.15mM KCl、0.05～0.15mM CaCl₂、0.05～0.15mM MgCl₂、0.3～0.6mM NaCl、0.1～0.3mM Na₂SO₄和0.2～0.5mM MES；NH₄⁺：0.8～1.2mM KCl、0.05～0.15mM CaCl₂和0.05～0.15mM NH₄Cl。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，校正后电极的能斯特方程计算理想值为：K⁺：56～60mV；NH₄⁺：56～60mV；Ca²⁺：25～29mV。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述K⁺离子流的流速为10～500pmol.cm^-2.s^-1，NH₄⁺离子流的流速为10～500pmol.cm^-2.s^-1，Ca²⁺离子流的流速为10～500pmol.cm^-2.s^-1。