[发明专利]一种检测克泻灵片中生物碱含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物化合物检测领域，特别涉及一种检测克泻灵片中生物碱含量的方法。

背景技术

克泻灵片由苦豆草为原料，按中成药片剂的常规工艺制成的能够清热解毒，祛风燥湿的中药制剂，临床用于治疗湿热泄泻，痢疾。

苦豆草为豆科植物苦豆子Sophora alopecuroides L.的干燥地上部分，又称苦甘草、苦豆根，其化学成分主要有喹诺里西啶类生物碱和黄酮两大类，其生物碱主要包括槐定碱、苦参碱、槐果碱、苦豆碱、槐胺碱、金雀花碱、氧化苦参碱及N-甲基金雀花碱等。目前，生物碱的含量测定有重量法、酸碱滴定法、酸性染料分光光度法等，卫生部药品标准中药成分制剂》第十八册WS3-B-3408-98记载的克泻灵片的质量标准中，生物碱的测定方法为重量法，该方法专属性较差，所用试剂毒性大，准确性和重复性差，且操作繁琐。因此，提供一种检测克泻灵片中生物碱含量的方法，具有现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种检测克泻灵片中生物碱含量的方法。在该方法提供的高效液相色谱条件下，分别检测不同浓度的对照品溶液和待测品溶液的峰面积，以对照品溶液的浓度和峰面积制作标准曲线，用待测品溶液的峰面积与标准曲线比较，获得待测品溶液中生物碱的浓度。该检测方法精密度高，稳定性、重复性、准确度较好，避免了毒性试剂的使用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种检测克泻灵片中生物碱含量的方法，包括如下步骤：

取生物碱对照品制备对照品溶液；

取克泻灵片制备供试品溶液；

取不同浓度的对照品溶液经高效液相色谱法获得对照品峰面积，以所述对照品溶液的浓度和所述对照品峰面积制作标准曲线；

取供试品溶液，经高效液相色谱法获得供试品峰面积，与所述标准曲线比较，获得供试品溶液中生物碱含量；

所述高效液相色谱法的流动相包括酸的水溶液、乙腈、无水乙醇，所述酸的水溶液、所述乙腈、所述无水乙醇的体积比为90～98∶1～5∶1～5；所述酸选自磷酸、醋酸、甲酸。

外标法是仪器分析常用的方法之一，比较法的一种。外标法在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。

外标法在操作和计算上可分为校正曲线法和用校正因子求算法。校正曲线法是用已知不同含量的标样系列等量进样分析，然后做出响应信号与含量之间的关系曲线，也就是校正曲线。定量分析样品时，在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品，从色谱图上测出峰高或峰面积，在从校正曲线查出样品的含量。

作为优选，所述酸的水溶液中酸与水的体积比为1～3∶100。

作为优选，所述酸的水溶液、所述乙腈、所述无水乙醇的体积比为90～96∶2～5∶2～5。

作为优选，所述高效液相色谱法的检测波长为205～280nm。

作为优选，所述高效液相色谱法的柱温为25～35℃。

作为优选，所述高效液相色谱法的色谱柱为普通C18柱。

作为优选，所述对照品溶液的制备方法为称取槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱，加甲醇制得浓度为13～142μg/mL的对照品溶液。

作为优选，所述供试品溶液的制备方法为取克泻灵片，加入甲醇后超声提取，制得供试品溶液，以mg/mL计，所述克泻灵片与所述甲醇的质量体积比为100∶40～50。

作为优选，所述超声提取时间为20～40min。

作为优选，所述生物碱包括槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱。

本发明提供一种检测克泻灵片中生物碱含量的方法，在该方法提供的高效液相色谱条件下，分别检测不同浓度的对照品溶液和待测品溶液的峰面积，以对照品溶液的浓度和峰面积制作标准曲线，用待测品溶液的峰面积与标准曲线比较，获得待测品溶液中生物碱的浓度。该检测方法精密度高，稳定性、重复性、准确度较好，避免了毒性试剂的使用。

附图说明

图1示实施例1中1号量瓶中对照品溶液的高效液相色谱图；横坐标为保留时间，纵坐标为峰面积；其中，保留时间为8.050min的峰为苦参碱，保留时间为9.166min的峰为槐定碱，保留时间为13.374min的峰为氧化苦参碱；