[发明专利]一种γ-氨基丁酸转运蛋白及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种蛋白，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与转运γ-氨基丁酸相关的由序列2衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因；

所述基因具体是如下(1)或(2)或(3)的DNA分子：

(1)序列表中序列1所示的DNA分子；

(2)在严格条件下与(1)限定的DNA序列杂交且编码转运γ-氨基丁酸相关蛋白的DNA分子；

(3)与(1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码转运γ-氨基丁酸相关蛋白的DNA分子。

3.含有权利要求2所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；

或扩增权利要求2所述基因全长或其任意片段的引物对。

4.权利要求1所述蛋白、权利要求2所述基因或权利要求3所述重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在转运γ-氨基丁酸中的应用。

5.一种DNA分子，其核苷酸序列为序列表中的序列3。

6.含有权利要求5所述的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；所述重组载体具体为将权利要求5所述DNA分子插入pK18mobsacB的多克隆位点间得到的载体。

7.一种重组菌A，为抑制目的菌中权利要求1所述蛋白的表达或活性得到。

8.根据权利要求7所述的重组菌A，其特征在于：

所述抑制目的菌中权利要求1所述蛋白的表达或活性通过同源重组实现；

所述同源重组的方法具体为将权利要求5所述的DNA分子导入目的菌；

所述权利要求5所述的DNA分子具体通过权利要求6所述的重组载体导入目的菌；

所述目的菌为原核细菌，所述原核细菌具体为谷氨酸棒杆菌；所述谷氨酸棒杆菌尤其优选为谷氨酸棒杆菌RES167。

9.一种重组菌，为将谷氨酸脱羧酶编码基因导入权利要求7或8所述的重组菌A中得到的重组菌；

所述谷氨酸脱羧酶的氨基酸序列具体为序列中的序列5；

所述谷氨酸脱羧酶的编码基因的核苷酸酸序列具体为序列表中的序列4。

10.权利要求9所述的重组菌在制备γ-氨基丁酸中的应用；

或一种制备γ-氨基丁酸的方法，为发酵权利要求9所述的重组菌，收集发酵产物，即得到γ-氨基丁酸。