[发明专利]一种米非司酮诱导的caspase-1-ES细胞系有效

专利信息
申请号: 201110373341.X 申请日: 2011-11-22
公开(公告)号: CN102424818A 公开(公告)日: 2012-04-25
发明(设计)人: 乐卫东;王颐;杨德华 申请(专利权)人: 上海交通大学医学院附属瑞金医院
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/85;A61K35/54;A61P1/16;A61P3/10;A61P9/00;A61P9/10;A61P19/04;A61P19/08;A61P21/04;A61P25/00;A61P25/14;A61P25/16
代理公司: 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 代理人: 金重庆
地址: 200025 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 米非司酮 诱导 caspase es 细胞系
【权利要求书】:

1.一种米非司酮诱导的caspase-1-ES细胞系,其特征在于,所述的caspase-1-ES细胞系的保藏号为CCTCC C201193。

2.一种米非司酮诱导的caspase-1-ES细胞系的制备方法,其特征在于,所述的制备方法包括以下步骤:

a、pSwitch质粒线性化后用Lipofectamine 2000转染入CGR8细胞,用Hygromycin筛选出pSwitch稳转株;

b、PCR反应扩增caspase-1的全长cDNA;

c、对caspase-1 cDNA和pGene载体进行双酶切,酶切产物以Solution I连接后转化入大肠杆菌;

d、从大肠杆菌中抽提质粒,线性化后用Lipofectamine 2000转染入pSwitch稳转株,用Zeosin筛选稳转株;

e、挑单克隆进行扩增,用RT-PCR和western blot鉴定。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤b中caspase-1的全长cDNA序列如SEQ ID NO.3所述。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤b中PCR反应扩增caspase-1的全长cDNA所用的引物序列如SEQ ID NO. 1和SEQ ID NO.2所述。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的ES细胞为小鼠ES细胞。

6.根据权利要求1所述的caspase-1-ES细胞系在制备治疗帕金森病药物中的应用。

7.根据权利要求1所述的caspase-1-ES细胞系在干细胞移植中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的caspase-1-ES细胞系在干细胞移植中的应用是指caspase-1-ES细胞系在制备治疗可以采用干细胞移植来治疗的疾病药物中的应用,所述的可以采用干细胞移植来治疗的疾病是指脑瘫、脊髓损伤、运动神经元病、脑出血、脑梗塞后遗症、脑外伤后遗症、糖尿病、皮肌炎、肌无力、血管病变、硬化病、白血病、肝病、肝硬化、股骨头坏死。

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