[发明专利]一种米非司酮诱导的caspase-1-ES细胞系有效
申请号: | 201110373341.X | 申请日: | 2011-11-22 |
公开(公告)号: | CN102424818A | 公开(公告)日: | 2012-04-25 |
发明(设计)人: | 乐卫东;王颐;杨德华 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院附属瑞金医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/85;A61K35/54;A61P1/16;A61P3/10;A61P9/00;A61P9/10;A61P19/04;A61P19/08;A61P21/04;A61P25/00;A61P25/14;A61P25/16 |
代理公司: | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人: | 金重庆 |
地址: | 200025 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 米非司酮 诱导 caspase es 细胞系 | ||
1.一种米非司酮诱导的caspase-1-ES细胞系,其特征在于,所述的caspase-1-ES细胞系的保藏号为CCTCC C201193。
2.一种米非司酮诱导的caspase-1-ES细胞系的制备方法,其特征在于,所述的制备方法包括以下步骤:
a、pSwitch质粒线性化后用Lipofectamine 2000转染入CGR8细胞,用Hygromycin筛选出pSwitch稳转株;
b、PCR反应扩增caspase-1的全长cDNA;
c、对caspase-1 cDNA和pGene载体进行双酶切,酶切产物以Solution I连接后转化入大肠杆菌;
d、从大肠杆菌中抽提质粒,线性化后用Lipofectamine 2000转染入pSwitch稳转株,用Zeosin筛选稳转株;
e、挑单克隆进行扩增,用RT-PCR和western blot鉴定。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤b中caspase-1的全长cDNA序列如SEQ ID NO.3所述。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤b中PCR反应扩增caspase-1的全长cDNA所用的引物序列如SEQ ID NO. 1和SEQ ID NO.2所述。
5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述的ES细胞为小鼠ES细胞。
6.根据权利要求1所述的caspase-1-ES细胞系在制备治疗帕金森病药物中的应用。
7.根据权利要求1所述的caspase-1-ES细胞系在干细胞移植中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的caspase-1-ES细胞系在干细胞移植中的应用是指caspase-1-ES细胞系在制备治疗可以采用干细胞移植来治疗的疾病药物中的应用,所述的可以采用干细胞移植来治疗的疾病是指脑瘫、脊髓损伤、运动神经元病、脑出血、脑梗塞后遗症、脑外伤后遗症、糖尿病、皮肌炎、肌无力、血管病变、硬化病、白血病、肝病、肝硬化、股骨头坏死。
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