[发明专利]一种制备泼尼松龙的方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物制药及医药工程领域，具体涉及一种制备泼尼松龙的方法。

背景技术

泼尼松龙(prednisone)，其化学名为：11β，17α，21-三羟基-孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(11β，17α，21-trihydroxypregna-1，4-diene-3，20-dione)，结构式如下图所示，是一种极微溶于水的肾上腺皮质激素，具有很好的抗炎及抗过敏作用，在诸如关节炎、哮喘、支气管炎等炎症中广泛使用。能抑制结缔组织的增生，降低毛细血管壁和细胞膜的通透性，减少炎性渗出，并能抑制组胺及其它毒性物质的形成与释放。还能促进蛋白质分解转变为糖，减少葡萄糖的利用。因而使血糖及肝糖原都增加，可出现糖尿，同时增加胃液分泌，增进食欲。当严重中毒性感染时，与大量抗菌药物配合使用，可有良好的降温、抗毒、抗炎、抗休克及促进症状缓解作用。其水钠潴留及排钾作用比可的松小，抗炎及抗过敏作用较强，副作用较少，故比较常用。适用于类风湿关节炎、风湿热、红斑狼疮、皮肌炎、多发性骨髓瘤等。而且还可作为其它甾体激素的原料中间体。

目前，工业上多采用化学合成的方法生产，收率较低，且对环境及操作人员都有很大危害；且该方法工艺步骤沉长，引入化学试剂较多，难于保证质量，成本高，投料浓度低，转化效果差，这限制了大规模工业化生产。因此，研究和开发一种收率高、工艺简单、经济实用且对环境和操作人员安全的生产方法，对用生物转化法生产甾体药物有着非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足之处，提供一种以泼尼松为原料，产朊假丝酵母菌作为生物催化剂的制备泼尼松龙的方法，该方法收率高、选择性好、工艺简单、经济实用且对环境和操作人员安全。

本发明实现目的的技术方案如下：

一种制备泼尼松龙的方法，采用产朊假丝酵母菌为发酵菌种，以泼尼松为原料，发酵获得泼尼松龙。

而且，所述的产朊假丝酵母菌由中国普通微生物菌种保藏中心保存，其编号为CGMCC 2.1180，分类为：产朊假丝酵母菌Candida utilis。

而且，具体步骤如下：

(1)获得产朊假丝酵母菌发酵液；

(2)将泼尼松在无菌条件下投入到产朊假丝酵母菌发酵液中，投料量为摇瓶装液体积的3‰，再加入产朊假丝酵母菌发酵液体积2～7％(v/v)的有机溶剂，摇床30～33℃下转化40～50小时，过滤，收集滤饼，既得泼尼松龙。

而且，所述泼尼松的粒度为14～16μm。

而且，在发酵培养基灭菌前加0.03-0.1％ g/mL的泼尼松作诱导物。

而且，所述的有机溶剂为甲醇或乙醇或二甲基亚砜。

本发明的优点和积极效果：

1、本发明提供的泼尼松龙的制备方法，以产朊假丝酵母菌为菌种、泼尼松为原料并采用微生物一步C₁₁位酮基还原制备泼尼松龙，本方法具有反应专一性好，操作简单，成本低，且产物单一，易于分离纯化的优点。

2、本发明克服了现有步骤繁琐、使用危险试剂、生产成本高、分离纯化麻烦的缺点，能够尽量避免使用各种有害试剂，对用生物转化法生产甾体药物有着非常重要的意义。

附图说明

图1为本发明底物标品；

图2为本发明产物标品；

图3为本发明实施例1菌体培养液中C₁₁位酮基还原的高效液相色谱图；其中前一个峰为泼尼松龙产物峰，后一个峰为泼尼松原料峰；

图4为本发明实施例2菌体培养液中C₁₁位酮基还原的高效液相色谱图；其中前一个峰为泼尼松龙产物峰，后一个峰为泼尼松原料峰；

图5为本发明实施例3菌体培养液中C₁₁位酮基还原的高效液相色谱图；其中前一个峰为泼尼松龙产物峰，后一个峰为泼尼松原料峰。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。

本发明中采用的泼尼松原料的分子结构式如式I所示，最终所生产出的泼尼松龙的分子结构式如式II所示。

其转化的化学反应式为：