[发明专利]一种生二素链霉菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种新的生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)及其应用。

背景技术

siamycin II是由链霉菌属菌株AA3891(ATCC55286)生产的多肽抗生素，对枯草杆菌、微球菌、金黄色葡萄球菌(包括MASA)具有较强的抗菌活性，另外，对HIV和HSV病毒也有较强的活性，ID50分别为9和27μg/ml。其结构式如图1所示，化学式为C₉₈H₁₃₃N₂₃O₂₆S₄，分子量为2177。siamycin II为白色粉末，可溶于二甲亚砜和甲醇，微溶于碱性水，但在乙酸乙酯、氯仿和水中几乎不可溶。硫酸反应呈阳性，茚三酮和Sakaguchi测试呈阴性。

根据文献报道，链霉菌AA3891(ATCC55286)发酵生产siamycin II的培养基组分如下：soluble starch 2％，glucose 1％，Pharmamedia 1％，Brewer’s yeast extract 0.3％，NZ-amine 0.3％，Allophane 0.5％和CaCO₃ 0.3％，pH 7.0。在28℃，200rpm的条件下培养112小时后，培养上清用n-丁醇抽提后真空浓缩。浓缩固体用Diaion HP-20(40mm i.d.×300mm)进行柱纯化，首先用30％甲醇水溶液洗柱，然后用80％甲醇水溶液洗脱。在洗脱过程中进行合胞体抑制分析(SIA)检测，具有活性的洗脱样品经蒸发获得siamycin II。

发明内容

本发明的发明人分离得到了一株菌株，命名为HCCB10327，经鉴定其为链霉菌属的生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)。进一步的研究发现，该菌株能够发酵生产siamycin II。

因此，本发明的首要目的就在于，提供一种生二素链霉菌(Streptomycesambofaciens)HCCB10327。

本发明的另一个目的在于，提供所述生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)的应用。

根据本发明，所述生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)HCCB10327的保藏号为CGMCC No.5411。

根据本发明，所述生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)HCCB10327可用于通过发酵制备siamycin II。

根据本发明，所述生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)HCCB10327的发酵的种子培养条件如下：

在28℃下培养40～48小时；

种子培养基组成：葡萄糖1％，玉米淀粉2％，酵母提取物0.5％，酶水解酪素0.5％，碳酸钙0.0002％，pH 7.1。

根据本发明，所述生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)HCCB10327发酵的发酵培养条件如下：

在28℃下培养115～120小时；

发酵培养基组成：葡萄糖2％，可溶性淀粉3％，玉米浆粉1％，黄豆饼粉(热)1％，胰蛋白胨0.5％，氯化钠0.3％，碳酸钙0.5％，谷氨酸钠0.2％。

根据本发明，所述siamycin II的制备还包括将发酵液经大孔树脂吸附和制备型HPLC分离的步骤。

本发明的生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)能够发酵生产siamycin II，从而为siamycin II的生产开辟了一条新的途径。

附图说明

图1是siamycin II的结构示意图。

图2是生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)HCCB10327的系统进化树分析结果图。

图3是siamycin II纯品的MS分析结果图。

图4是siamycin II的氨基酸分析结果图。

图5是siamycin II的核磁共振H谱分析结果图。

本发明的生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)HCCB10327已提交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏日期2011年10月28日，保藏号为CGMCC No.5411。

具体实施方式