[发明专利]基于I型胶原凝胶的细胞微球制备与成丝的方法

权利要求书

1.基于I型胶原凝胶的细胞微球制备与成丝的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

步骤1、将细胞与2-20ml含50%-80% I型胶原凝胶颗粒的培养液通过材料入口(11)注入锥形细胞微球培养室(13)，将培养液经培养液入口(6)注入，培养液经过培养液流入管(17)流经层流发生板(14)，在锥形细胞微球培养室(13)内形成流化床层流托举层，调节培养液流量的大小，控制培养液流托举层的形状与强弱，使得细胞与I型胶原凝胶颗粒悬浮在托举层上进行粘附培养，在培养过程中，定期通过材料入口(11)将I型胶原凝胶颗粒注入锥形细胞微球培养室(13)，促进细胞与I型胶原凝胶颗粒的粘附与培养；在培养过程中，培养液形成稳定托举层后将通过锥形细胞微球培养室(13)的边缘流出，经过培养液流出管(15)和培养液出口(16)流出，形成一个循环的回路，保证了培养液形成的流化床托举层的稳定；

步骤2、当细胞与I型胶原凝胶颗粒悬浮在托举层上粘附培养时，细胞数量不断增加，为此，在培养过程中，定期通过材料入口(11)将I型胶原凝胶颗粒注入锥形细胞微球培养室(13)，使得细胞与I型胶原凝胶颗粒在流化托举层相互接触粘附，形成更多新的细胞微球，新的细胞在I型胶原凝胶颗粒上不断扩增形成细胞基质含量丰富的细胞微球，这样循环往复的培养，使得细胞不断扩增，细胞微球的数量也不断增多；这样连续培养6-20天，结束细胞微球的制备；

步骤3、当细胞微球制备完成后，停止培养液注入锥形细胞微球培养室(13)，开启电机(9)旋转，电机转轴通过传动轴(7)带动细胞微球扩增培养装置旋转，使得锥形细胞微球培养室(13)内的培养液产生动旋流运动，将细胞微球聚集在培养液的中心表面位置，采用吸管沿材料入口(11)伸入锥形细胞微球培养室(13)即可将细胞微球取出；

步骤4、将培养好的细胞微球经细胞微球入口(30)注入，同时，将I型胶原凝胶溶液通过蠕动泵（21）和蠕动泵（29）注入，并经过I型胶原-培养液右入口(23)和I型胶原-培养液左入口（32）流入位于细胞微球成丝平台（24）上的混合容器（31），形成螺旋向下的流动，并与细胞微球会合流入细胞微球-I型胶原成丝管（27），由于形成了下螺旋运动，能够将细胞微球固定在细胞微球-I型胶原成丝管（27）的中央位置并均匀向下运动进入37℃洁净空气定型室（33）；

步骤5、将37℃恒温洁净空气经过37℃恒温洁净空气右入口（25）和37℃恒温洁净空气左入口（34）流入位于支承杆（26）内的37℃洁净空气定型室（33），最后，通过37℃恒温洁净空气出口（35）竖直向下流出，对整个细胞微球-I型胶原成丝管（27）进行保温的作用，使得I型胶原包被的细胞微球活性丝线定型流出；

步骤6、流出的细胞微球活性丝线进入位于底座（28）上并装满培养液的细胞微球丝线收集容器（36），获得了具有细胞微球活性的丝线。