[发明专利]一种百合丛生芽诱导的培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物的诱导的培养基，属于百合组织培养技术，具体地说是一种百合丛生芽诱导的培养基。

背景技术

百合(Lilium brownii var.viridulum)百合科百合属，主要应用价值在于观赏，其球根含丰富淀粉质，部分品种可作为蔬菜食用；以食用价值著称于世的我国兰州百合，最早记载在甘肃省平凉县志中，迄今已有450多年。目前兰州七里河等地区广泛栽种食用百合，在国内外享有很高声誉。兰州百合个大、味甜，既可作点心，又可作菜肴。百合还可制作成百合干、百合粉，在国际市场上价格很高。到目前为止，百合仍然是中药中的常用药材。

中医认为百合性微寒平，具有清火、润肺、安神的功效，其花、鳞状茎均可入药，是一种药食兼用的花卉。百合花素有“云裳仙子”之称。百合茎尖分生组织培养繁殖的常用方法是一个茎尖分生组织诱导分化出一个芽，此种方法费工费时且效率低，生产上利用价值不大。在很多植物的组培快繁中，均利用诱导出丛生芽的技术来提高繁殖系数，以达到事半功倍的效果；但现在有的从百合体胚诱导出丛生芽的繁殖系数仍偏低。

发明内容

本发明旨在提供一种百合丛生芽诱导的培养基，用于百合的组培快繁，利用从一个百合茎尖分生组织，先诱导出胚性愈伤组织、体胚，最后诱导出丛生芽，得到大量同质无性系，提高百合茎尖培养的繁殖系数，为工厂化生产百合组培苗提供技术依据。

为实现上述目的，本发明所述的一种百合丛生芽诱导的培养基，其特征在于：是将赤霉素、激动素、酪蛋白、牛肉膏、磷酸氢二钠、氯化钠、琼脂、蒸馏水、0.4％溴麝香草酚蓝溶液溶解于基本培养基MS中而成的；其各组份的用量为：以1L基本培养基MS加入量计：赤霉素2～4mg、激动素1～2mg、酪蛋白8～15g、牛肉膏2～5g、磷酸氢二钠2～5g、氯化钠3～8g、琼脂12～20g、蒸馏水1000mL、0.4％溴麝香草酚蓝溶液12.0～15.0mL。

本发明所述的一种百合丛生芽诱导的培养基，其具体实现方式步骤如下：

一、取健康饱满百合丛生芽，用70％体积百分含量的酒精表面消毒1分钟，无菌水冲洗3次后，再用0.1％质量百分含量的升汞消毒30s，无菌水冲洗3次，每次1min；然后，将消毒后的百合丛生芽接种百合丛生芽诱导的培养基中；每个培养皿中外植体个数为5个；将接种后培养皿置于光照培养箱中，温度为25±2℃，光照时间为12小时，光照强度为90uMm^-2s^-1；

二、培养2～3周后大部分丛生芽能萌发长出幼叶，接种3周的萌发率为75％；2个月后，丛生芽生长旺盛，苗高达1.5～3.0cm；

三、取苗高为1.5～3.0cm萌发小苗100株，转接到生根培养基上，置于光照培养箱中，培养温度为25±2℃，光照时间为10小时，光照强度为110uM^-2s^-1；

四、生根苗先在培养箱中开盖锻炼3天，然后从培养瓶中取出，洗净根部的培养基，移栽到温室中6×6cm的营养钵中；栽培介质为按1∶1体积比混合的草炭土和蛭石，装钵前用浓度为0.1％的多菌灵对栽培介质进行消毒；移栽后的前3～5天覆盖地膜，保持温室的光照强度为200uM^-2s^-1，温度为20～28℃，相对湿度为70～100％；结果炼苗成活率(炼苗成活率＝营养钵中成活的株数/移栽的试管苗株数)；

五、炼苗成活率达到92±3％，除去地膜，进行浇水、施肥等正常管理，当苗高达到20～30cm时，即可移栽到室外大田上，移栽成活率为100％。

所述培养基是将赤霉素、激动素、酪蛋白、牛肉膏、磷酸氢二钠、氯化钠、琼脂、蒸馏水、0.4％溴麝香草酚蓝溶液溶解于基本培养基MS中而成的；其各组份的用量为：以1L基本培养基MS加入量计：赤霉素2～4mg、激动素1～2mg、酪蛋白8～15g、牛肉膏2～5g、磷酸氢二钠2～5g、氯化钠3～8g、琼脂12～20g、蒸馏水1000mL、0.4％溴麝香草酚蓝溶液12.0～15.0mL。

所述培养基的制作方法是将赤霉素、激动素、酪蛋白、焦糖、琼脂溶解于MS，搅拌均匀，PH值调整为6.0～6.4之间。

所述述原料中，MS为基本培养基，提供培养组织生长发育所需的无机营养元素和部分有机营养元素；赤霉素、激动素是植物生长调节剂，具有促进培养组织形成丛生芽的作用；酪蛋白提供有机多肽类营养元素；焦糖提供培养组织生长发育所的碳素营养；琼脂的主要作用是固化培养基，起支撑作用。